北京協和醫院整形美容外科護理工作指南（簡體書）

全書包括五部分內容，分別為酶學基礎實驗、微生物發酵產酶實驗、酶的提取與分離純化實驗、酶的固定化及分子修飾實驗以及酶的應用實驗。基本涵蓋酶工程領域的基礎實驗內容。本書可作為生物技術、生物工程、食品生物技術、生物製藥等專業學生的參考用書，也可供相關行業的技術人員參考。

王君，濱州學院生物工程學院，副院長，2008年獲得南開大學微生物學專業博士學位後，就職於濱州學院生物工程學院、山東省黃河三角洲生態環境重點實驗室，主要研究方向為資源細菌及其工程學，在環境中微生物的多樣性調查、功能微生物菌種選育、馴化及應用方面取得了多項研究成果。主持完成國家自然科學基金項目1項，山東省自然科學基金項目1項，山東省高等學校科技計畫項目1項，山東省科技發展計畫項目1項，濱州學院博士基金及重大研究課題各1項，與企業合作研發項目4項。發表文章SCI、EI及核心期刊文章20多篇，已獲得國家發明專利4項。主講《酶工程》、《酶工程實驗》，積極參與該課程的教學改革中，通過完成校級重點教研課題，搭建開放實驗室教學平臺，深化酶工程實驗教學改革；立項《酶工程實驗指導》教材編寫項目。近五年，指導本科畢業論文38人次，2次獲得省級優 秀學士學位論文指導教師稱號。

第一部分 酶學基礎實驗1
實驗一 酶促反應中初速度時間範圍測定 1
實驗二 pH對酶活力的影響——最適pH的測定 5
實驗三 溫度對酶活力的影響——最適溫度的測定 8
實驗四 米氏常數和最大反應速率的測定 11
實驗五 抑制條件下Km和vmax的測定及抑制類型的判定 15

第二部分 微生物發酵產酶實驗 20
實驗六 產澱粉酶菌株的快速篩選 20
實驗七 鹼性蛋白酶高產菌株的選育 24

第三部分 酶的提取與分離純化實驗 28
實驗八 酵母中蔗糖酶的提取及酶活測定 28
實驗九 α-澱粉酶的提取及活力測定 32
實驗十 酸性磷酸酯酶的提取和酶活力測定 36
實驗十一 溶菌酶的製備及活力測定 40
實驗十二 大蒜細胞SOD的提取和分離 43
實驗十三 離子交換色譜法分離蛋白 46
實驗十四 聚丙烯醯胺凝膠電泳分離蛋白 50

第四部分 酶的固定化及分子修飾實驗 57
實驗十五 蔗糖酶包埋及固定化酶活測定 57
實驗十六 尼龍固定化木瓜蛋白酶 60
實驗十七 酵母細胞固定化 63
實驗十八 膽綠素還原酶的修飾與活性基團的鑒定 66

第五部分 酶的應用實驗 69
實驗十九 澱粉的糖化及DE值的測定 69
實驗二十 酶法澄清蘋果汁加工工藝優化 74
實驗二十一 酶反應器設計及酪蛋白水解物的製備 76
實驗二十二 酶試紙法檢測樣品中H2O2的濃度 79
實驗二十三 鄰苯二酚雙加氧酶基因在大腸桿菌中的表達 82

參考文獻 86

附錄 88