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《植物組織培養實驗指導》內容簡介：植物組織培養技術是一門實用性非常強的現代生物技術課程，也是植物基因工程實驗的基礎和關鍵技術之一。目前，農業產業化、農業產業結構調整、城市綠化、退耕還林工程等需要大量的持續優質高效的經濟植物、花卉園林植物、園藝植物種子種苗，通過植物組織培養技術和植物非試管快繁技術可實現植物的規模化繁殖和種植，將為觀賞植物種子種苗工程帶來一次全新的育苗革命。水培花卉因其觀賞價值而具有很大的市場前景，深受人們喜愛。
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《植物組織培養實驗指導》是由科學出版社出版的。
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前言實驗一 玻璃器具等的清洗、烘干、包扎、滅菌實驗二 培養基母液的配制實驗三 培養基的配制、滅菌及分裝實驗四 外植體表面消毒和接種實驗五 愈傷組織的誘導與增殖實驗六 外植體不定芽的分化實驗七 常見植物離體快繁技術實驗八 莖尖脫毒技術實驗九 馬鈴薯試管微型薯的誘導實驗十 成熟胚培養實驗十一 花藥培養實驗十二 人工種子制作實驗十三 植物細胞懸浮培養技術實驗十四 植物細胞生長和活力的測定實驗十五 細胞微室培養技術實驗十六 原生質體的分離和培養實驗十七 原生質體融合實驗十八 植物水培技術實驗十九 植物非試管快繁技術實驗二十 農桿菌介導的植物遺傳轉化實驗二十一 轉基因植株基因組DNA的提取實驗二十二 轉基因植株PCR鑒定附錄一 植物組織培養常用培養基配方附錄二 常水培營養液配方附錄三 常見 植物激素單位換算附錄四 常見植物激素的配制和貯存附錄五 常見抗生素的配制和貯存主要參考文獻
書摘/試閱
植物遺傳轉化是指將外源基因轉移到植物體內并穩定地整合表達與遺傳的過程。在這一過程中，建立穩定、高效的遺傳轉化體系是實現某一植物遺傳轉化的先決條件。目前，遺傳轉化的方法有農桿菌介導法、基因槍法、電擊法、花粉管通道法、PEG誘導融合法等，其中，農桿菌介導的遺傳轉化法是外源I）NA進入植物細胞的最成功和應用最廣泛的方法，農桿菌可浸染大多數雙子葉植物和少數單子葉植物，甚至裸子植物。轉化植物細胞的農桿菌主要有兩類，即根癌農桿菌已有研究表明，影響農桿菌介導植物基因轉化的因素很多，農桿菌菌株、植物基因型和外植體、培養方法、不同的選擇標記等因素都影響農桿菌介導的遺傳轉化。目前報道已有許多植物通過農桿菌的遺傳轉化獲得了轉基因植株或毛狀根。農桿菌介導的遺傳轉化工作分為植物表達載體的構建、轉化系統的建立、目的基因的轉化、轉化體的篩選與獲得、轉基因植株的分子檢測與轉基因植株的獲得。農桿菌的培養、生長狀態和純度對轉化具有重要作用。如果農桿菌本身生長不良，則其侵染能力大大下降。農桿菌介導的遺傳轉化過程為：先將外植體切割成小塊，然後將含傷口的小塊浸泡在制備好的轉化用農桿菌菌液中，浸泡一定時間後，用吸水紙吸干水分，放到不添加抗生素的MS培養基中共培養。3d後，將共培養的外植體轉接到含有羧芐青霉素等脫菌抗生素的培養基上進行外植體的脫菌培養。繼代多次，將殘留的農桿菌殺死。後轉移到篩選培養基上篩選再生植株，轉化細胞在含相應抗生素的培養基上正常生長，而非轉化細胞死亡。對生長正常的轉化植株進行分子生物學鑒定從而獲得轉基因植株。
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