生物化學與分子生物學實驗指導（簡體書）

《生物化學與分子生物學實驗指導》涉及面較廣，并且有一些較大型的連續性實驗，還有部分實驗來源于教師的科研成果。我們希望通過《生物化學與分子生物學實驗指導》的學習，使學生能夠順利完成根據實際情況所選擇的實驗內容，掌握生物化學與分子生物學實驗最基本的技術，并在今后的研究和工作中能靈活應用。

第一篇基礎理論和技術
第一章 離心技術
第一節 基本原理
第二節 離心機的種類和基本結構
第三節 常用離心技術
第四節 離心技術在生物學研究中的應用

第二章 分光光度法
第一節 基本原理
第二節 分光光度計
第三節 分光光度技術的應用

第三章 層析技術
第一節 層析基本理論
第二節 常用的層析技術

第四章 電泳技術
第一節 基本原理
第二節 電泳的分類
第三節 常用的電泳技術

第五章 生物化學實驗樣品制備技術
第一節 生物大分子制備的特點和一般步驟
第二節 植物樣品的制備
第三節 動物樣品的制備
第四節 微生物樣品的制備
第五節 生物大分子——蛋白質
第六節 生物大分子——核酸

第六章 真核生物基因文庫的構建
第一節 cDNA文庫的概念
第二節 cDNA文庫構建的策略
第三節 cDNA文庫的篩選

第七章 核酸雜交技術
第一節 分子雜交的一般過程
第二節 分子雜交的種類
第三節 探針
第四節 印跡技術
第五節 雜交體系
第六節 雜交信號的檢測方法

第八章 聚合酶鏈式反應
第一節 聚合酶鏈式反應的發展歷史
第二節 PCR的原理
第三節 PCR體系與條件
第四節 PCR循環參數的確定
第五節 PCR需注意的事項
第六節 PCR的種類及用途

第九章 基因工程
第一節 基因工程的基本概念
第二節 基因工程的發展歷史
第三節 基因工程的研究意義
第四節 基因工程的基本內容

第十章 DNA序列測定技術
第一節 概述
第二節 Sanger雙脫氧鏈終止法
第三節 Maxam-GilbertDNA化學降解法
第四節 測序策略
第五節 DNA序列測定自動化

第十一章 生物芯片技術
第一節 生物芯片的概念
第二節 生物芯片技術的發展歷史
第三節 生物芯片的分類及特點
第四節 常用生物芯片的應用

第二篇 生物化學實驗
第十二章 生物化學基礎實驗
實驗一 緩沖溶液的配制和氨基酸兩性性質的測定
實驗二 分光光度計線性分辨范圍的測定
實驗三 還原糖和總糖含量的測定
實驗四 用陽離子交換樹脂攝取氯化鈉
實驗五 蛋白質的沉淀反應
實驗六 定磷法測定RNA含量
實驗七 紫外吸收法測定核酸的含量
實驗八 可溶性糖的硅膠G薄層層析
實驗九 血糖含量的測定
實驗十 血清總膽固醇的測定
實驗十一 血清甘油三酯的測定
實驗十二 維生素C含量的測定(2，6-二氯酚靛酚法)
實驗十三 氨基氮測定——甲醛滴定法
實驗十四 酵母RNA的分離及組分鑑定

第十三章 生物化學綜合實驗
實驗十五 雙縮脲法測定蛋白質含量
實驗十六 Folin-酚試劑法測定蛋白質含量
實驗十七 考馬斯亮藍法測定蛋白質含量
實驗十八 離子交換柱層析法分離氨基酸
實驗十九 從牛奶中分離制備酪蛋白
實驗二十 葡聚糖凝膠層析
實驗二十一 等電聚焦電泳法測定蛋白質的等電點
實驗二十二 醋酸纖維薄膜電泳法分離血清蛋白質
實驗二十三 聚丙烯酰胺凝膠電泳法分離血清蛋白質
實驗二十四 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質的相對分子量
實驗二十五 蛋白質印跡(Western blot)
實驗二十六 血清谷丙轉氨酶活性的測定
實驗二十七 酶的專一性
實驗二十八 激活劑和抑制劑對酶活性的影響
實驗二十九 溫度對酶活性的影響
實驗三十 pH對酶活性的影響
實驗三十一 底物濃度對酶促反應速度的影響——Km值的測定
實驗三十二 綠豆超氧化物歧化酶的提取
實驗三十三 硫酸銨沉淀法純化SOD
實驗三十四 葡聚糖凝膠層析脫鹽
實驗三十五 有機溶劑分級沉淀法純化SOD
實驗三十六 離子交換層析法純化SOD
實驗三十七 SOD活性的測定
實驗三十八 綠豆SOD同工酶的鑑定
實驗三十九 等電聚焦電泳法測定SOD的純度及等電點

第三篇 分子生物學實驗
第十四章 分子生物學基礎實驗
實驗四十 質粒DNA的提取及純化
實驗四十一 質粒DNA的瓊脂糖凝膠電泳
實驗四十二 DNA酶切與連接
實驗四十三 DNA片段的回收
實驗四十四 植物組織基因組DNA的提取
實驗四十五 動物組織基因組DNA的提取
實驗四十六 細菌基因組DNA的制備
實驗四十七 大腸桿茵感受態細胞的制備
實驗四十八 外源DNA的連接與轉化
實驗四十九 重組轉化子的酶切鑑定

第十五章 分子生物學綜合實驗
實驗五十 PCR擴增外源基因
實驗五十一 Triz01法提取總RNA
……
第四篇 創新性實驗
附錄
參考文獻