細胞工程實驗（簡體書）

全書分5章共39個實驗，以動物細胞培養為基礎，以單克隆抗體制備的技術體系為主要內容，包括骨髓瘤細胞培養、小鼠免疫、細胞融合、克隆篩選、抗體檢測和細胞凍存等，以真核細胞轉基因技術、小鼠胚胎干細胞培養和iPSC誘導技術、流式細胞儀分析技術和激光掃描共聚焦顯微鏡技術等為延伸，并包括植物細胞工程的主體技術。由于該類實驗主要是以活細胞為操作對象，要求實驗的連貫性，所以比較適合集中安排課時，各校在具體教學中也可根據自身情況酌情調整。 本實驗教材為生物技術專業技能訓練設計，提供了一個先進、實用、系統而又可供選擇的實驗體系；適用于生物類各本科專業細胞工程實驗教學，也可用于生物相關專業的研究生實驗技能訓練以及生物專科學校的高級技能強化訓練。

實驗計劃
第1章 動物細胞培養技術
1-1 動物細胞培養實驗的器材準備
1-2 動物細胞培養用液的配制及過濾除菌
1-3 培養細胞的形態觀察、大小測定和照相記錄
1-4 動物細胞的傳代培養
1-5 動物細胞的原代培養
1-6 培養細胞的分裂指數和生長曲線測定
1-7 培養細胞的活性測定
1-8 培養細胞的染色體標本制備與分帶技術
1-9 培養細胞的超低溫凍存與復蘇
第2章 雜交瘤技術與單克隆抗體制備
2-1 抗原制備與小鼠免疫
2-2 飼養層細胞的制備
2-3 骨髓瘤細胞的制備
2-4 免疫脾細胞的制備
2-5 細胞融合和雜交瘤篩選
2-6 特異性單克隆抗體的檢測
2-7 雜交瘤細胞的克隆化培養(有限稀釋法)
2-8 單克隆抗體的制備與分離純化
2-9 雜交瘤細胞的保存
第3章 小鼠胚胎干細胞體外培養和分化技術
3-1 小鼠超數排卵
3-2 小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)飼養層的制備
3-3 小鼠胚胎干細胞(mESC)的分離培養與傳代
3-4 小鼠胚胎干細胞(mESC)的鑑定
3-5 小鼠胚胎干細胞的體外分化實驗
3-6 誘導多潛能幹細胞(iPSC)的制備
第4章 植物組織與細胞培養技術
4-1 植物組織與細胞培養基的配制
4-2 胡蘿卜愈傷組織誘導及繼代培養
4-3 胡蘿卜愈傷組織的“器官分化”與“體細胞胚發生”
4-4 馬鈴薯莖尖培養
4-5 胡蘿卜懸浮細胞培養
4-6 胡蘿卜人工種子製作
4-7 大麥原生質體的分離與電融合
第5章 真核細胞轉基因技術和檢測技術
5-1 磷酸鈣沉淀介導的轉基因技術
5-2 陽離子聚合物介導的轉基因技術
5-3 脂質體介導的轉基因技術
5-4 基因槍法介導的轉基因技術
5-5 細胞拆合和細胞重組
5-6 流式細胞儀分析技術
5-7 激光掃描共聚焦顯微鏡的使用和觀察
5-8 細胞凋亡的誘導及生化檢測
附錄1 縮略詞表
附錄2 常用培養基和試劑的配制
附錄3 常用實驗儀器
參考書目