生物技術綜合實驗（簡體書）

本書是高職高專“十一五”規劃教材★生物技術系列之一。本書共分為四部分。第一部分為基因工程技術，重點介紹外源基因在大腸桿菌中的克隆與表達，由9個實驗組成。第二部分是生物大分子的分離純化及活性檢測，包括大腸桿菌中表達的外源蛋白的分離純化與檢測（7個實驗）、動物血中超氧化物歧化酶提取、純化與活性鑒定（5個實驗）兩章。第三部分是細胞工程及檢測技術，分為雞胚成纖維細胞培養技術（9個實驗）、卵清蛋白多克隆抗體的制備與檢測（6個實驗）、原生質體的分離、融合與雜交細胞的篩選（7個實驗）三章。第四部分是發酵工程與酶工程，分為谷氨酸發酵生產技術（9個實驗）、實驗室啤酒發酵技術（13個實驗）、淀粉酶的發酵生產（9個實驗）三章。各學校可根據條件和培養方向選用。
本書可供高職高專生物技術類各專業學生使用，也可作為相關領域技術人員的參考書。

第一篇　基因工程技術
　第一章　外源基因在大腸桿菌中的克隆與表達
實驗一　大腸桿菌的對照培養、單菌落的分離及菌種保存
實驗二　大腸桿菌基因組DNA的提取
實驗三　PCR擴增制備目的基因
實驗四　質粒DNA提取
實驗五　質粒DNA和目的基因的酶切和連接
實驗六　瓊脂糖凝膠電泳檢測、回收目的基因
實驗七　感受態細胞的制備和重組子轉化
實驗八　轉化克隆的篩選和鑒定
實驗九　外源基因的誘導表達
第二篇　生物大分子的分離純化及活性檢測
　第二章　大腸桿菌中表達的外源蛋白的分離純化與檢測
實驗一　小量表達及細胞破碎
實驗二　表達蛋白的SDSPAGE電泳分析
實驗三　包涵體的洗滌、溶解、復性
實驗四　從包涵體中純化表達蛋白
實驗五　固化Ni＋吸收光譜純化histag表達蛋白
實驗六　Western blotting免疫印跡檢測表達蛋白
實驗七　堿性磷酸酶（AP）米氏常數（Km）的測定
　第三章　動物血中超氧化物歧化酶的提取、純化與活性鑒定
實驗一　原材料的預處理
實驗二　超氧化物歧化酶的活性測定
實驗三　粗酶液的制備
實驗四　金屬螯合色譜分離純化超氧化物歧化酶
實驗五　離子交換色譜純化超氧化物歧化酶　
第三篇　細胞工程及檢測技術
　第四章　雞胚成纖維細胞培養技術
實驗一　實驗器材的清洗
實驗二　實驗器材的包裝和消毒
實驗三　培養用液的配制和無菌處理
實驗四　雞胚成纖維細胞的原代細胞培養
實驗五　細胞克隆和純化
實驗六　細胞的傳代培養
實驗七　細胞生長曲線的測定
實驗八　細胞的凍存和復蘇
實驗九　動物細胞融合
　第五章　卵清蛋白多克隆抗體的制備與檢測
實驗一　實驗動物的抓取、固定和注射方法
實驗二　實驗動物的處死與取血方法
實驗三　實驗動物的免疫方法
實驗四　抗血清的制備
實驗五　雙向瓊脂擴散實驗檢測抗體效價
實驗六　間接ELISA法檢測抗體
　第六章　植物原生質體的分離、融合與雜交細胞的篩選
實驗一　培養基母液的配制
實驗二　培養基的配制與滅菌
實驗三　愈傷組織的誘導與培養
實驗四　原生質體的制備
實驗五　原生質體的活力測定
實驗六　原生質體的融合
實驗七　雜交細胞的篩選
第四篇　發酵工程與酶工程
　第七章　谷氨酸發酵生產技術
實驗一　谷氨酸菌種的制備
實驗二　噬菌體的檢測
實驗三　大腸桿菌谷氨酸脫羧酶酶粉的制備
實驗四　發酵過程中還原糖的測定
實驗五　發酵過程中谷氨酸含量的測定
實驗六　谷氨酸發酵液的除菌體
實驗七　谷氨酸的離子交換回收
實驗八　谷氨酸的等電回收及精制
實驗九　谷氨酸鈉質量控制及分析
　第八章　實驗室啤酒發酵技術
實驗一　啤酒酵母的純種分離
實驗二　啤酒酵母的計數
實驗三　啤酒酵母的質量檢查
實驗四　啤酒酵母的擴大培養
實驗五　麥芽汁的制備
實驗六　麥芽汁糖度的測定
實驗七　啤酒主發酵
實驗八　總還原糖含量的測定
實驗九　α氨基氮含量的測定
實驗十　酸度和pH的測定
實驗十一　酒精度的測定及原麥芽汁濃度的計算
實驗十二　色度和苦味物質含量的測定
實驗十三　二氧化碳含量的測定
　第九章　淀粉酶的發酵生產
實驗一　淀粉酶產生菌的分離、篩選與鑒定
實驗二　發酵條件優化及酶學性質研究
實驗三　淀粉酶產生菌的改良
實驗四　淀粉酶的發酵生產
實驗五　淀粉酶活力的測定
實驗六　鹽析處理和透析
實驗七　離子交換劑的色譜處理
實驗八　濃縮和冷凍干燥
實驗九　淀粉酶的包埋處理及熱穩定性測定
參考文獻