基因工程原理(第2版)（簡體書）

第二版前言
第一版前言
緒論
一、基因工程的理論和技術基礎及工作程序
二、基因工程技術的建立與發展
三、基因工程的產業化及應用
四、轉基因生物的安全性
第一章 基因工程的分子遺傳學基礎
第一節 基因和信息流
一、基因的概念
二、遺傳的中心法則
三、基因表達的調節——操縱子模型
第二節 核酸的生物化學
一、核酸大分子的結構
二、DNA雙螺旋的變性與復性
第三節 分子雜交
一、原位分子雜交
二、芯片技術
三、印跡雜交
四、異源雙鏈定位法和R環定位法
第四節 基因工程中常采用的酶類
一、序列特異的DNA限制性酶
二、連接酶和激酶
三、DNA聚合酶和RNA聚合酶
第五節 研究DNA和RNA
的方法
一、核酸的分離純化
二、電泳
三、DNA測序
四、體外突變
第六節 實例1：鑒別特定基因轉錄物的轉錄起始點
一、研究目的
二、已知的信息和試劑
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題

第二章 原核生物分子克隆的宿主和載體系統
第一節 應用廣泛的宿主菌
一、EcoLi K-12的生物學
二、細菌的限制與修飾系統
三、大腸桿菌的克隆載體
第二節 質粒載體
一、質粒生物學
一、質粒上常編碼抗生素抗性基因
三、質粒DNA克隆載體
四、通過轉化將DNA轉移到大腸桿菌中
第三節 噬菌體克隆載體
一、入噬菌體的生物學
一、入噬菌體克隆載體
三、M13噬菌體克隆載體
第四節 基因組DNA克隆載體
一、黏粒載體
二、酵母人工染色體載體
三、細菌人工染色體載體
四、Pl噬菌體載體和Pl人工染色體
五、哺乳動物人工染色體載體
第五節 外源DNA和載體連接的方法
一、外源DNA和載體連接方法的分類
二、定向克隆
第六節 實例2：擬南芥肌鈣網蛋白基因在E．coti中的調節表達
一、研究目的
二、已知的信息和試劑
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題

第三章 基因文庫的構建和篩選
第一節 基因文庫的構建
一、基因組文庫和cDNA文庫
二、構建基因文庫的克隆載體和篩選策略
三、亞克隆
第二節 cDNA文庫的構建和篩選
一、mRNA的分離純化
二、cDNA合成
三、cDNA克隆載體
第三節 cDNA文庫的篩選
一、簡并寡核苷酸探針
二、抗體探針
三、差示雜交
四、扣除雜交
第四節 cDNA表達文庫的功能篩選
一、蛋白質活性分析
二、酵母雙雜交系統
三、cDNA噬菌體展示技術
第五節 用克隆cDNA作為反應物
一、RNA印跡
二、RNase保護法
三、核連綴（轉錄）分析
第六節 實例3：體外克隆編碼細胞內信號蛋白的基因
一、研究目的
二、可利用的信息和資源
三、基本策略
四、注釋
五、可供參考的思路
習題

第四章 基因組DNA的分析
第一節 基因組作圖
一、遺傳圖和細胞學圖
二、物理圖
三、基因定位
第二節 基因組長DNA片段的操作
一、用熒光激活細胞分揀法來分揀染色體
二、標簽克隆法
三、用DNA池來篩選基因組文庫
第三節 基因調節序列作圖
一、用體外表達進行基因調節序列作圖
二、定位蛋白質結合位點的分析方法
三、電泳遷移率變動分析
第四節 實例4：通過定點克隆分離
一個人類致病基因
一、研究目的
二、已知的信息和試劑
三、基本策略
四、注釋
五、供參考的思路
習題

第五章 聚合酶鏈反應與連接酶反應
第一節 基本的PCR方法
一、PCR擴增循環
二、PCR需用的DNA聚合酶
三、PCR引物設計
……
第六章 培養細胞中克隆基因的表達
第七章 轉基因動植物
第八章 人類基因鑒定和基因診斷
第九章 基因治療