微生物學實驗(第4版)（簡體書）

本書著重介紹微生物學實驗的基本技術，適當增加了部分在生產、科研中常用的新技術。 全書共94個常用實驗，分為三部分：基礎實驗、綜合實驗和應用實驗。基礎實驗突出微生物學實驗的特點，系統地介紹了微生物學實驗的基本技術--無菌操作技術、顯微技術、製片染色技術、純培養技術、消毒滅菌技術、生長測定技術、生理生化實驗技術、分子微生物學基礎技術及免疫學技術等。綜合實驗介紹了常用的綜合實驗技術--抗生素效價及酶活力的測定、誘變育種、細胞融合、細菌接合、應用微生物的分離與鑒定、噬菌體的分離純化與效價測定及動物病毒的雞胚培養等技術。應用實驗結合生產和科研的實際，介紹了常用的應用實驗技術--應用微生物的篩選、菌種保藏、食品藥品中微生物的檢測、環境中微生物的檢測、致癌劑的微生物法檢測、固定化活細胞的製備及其發酵試驗、高密度培養、發酵培養基配方試驗、發酵條件的優選試驗、臺式自控發酵罐的發酵試驗等。各單位可根據自己的教學要求和實際條件，選做相應的實驗。書後附有相關染色液、試劑、溶液、消毒劑及培養基等的配製方法，還附有細菌鑒定及檢索、常用菌種和病毒學名及飲用水、食品、藥品等國家衛生標準等，方便使用。

目錄
前言
實驗須知
第一單元 無菌概念和無菌操作技術
實驗1-1 環境及人體表面微生物的檢測 1
實驗1-2 無菌操作技術 2
第二單元 顯微技術
實驗1-3 顯微鏡的使用及細菌形態的觀察 5
第三單元 微生物製片及染色技術
實驗1-4 細菌的單染色法 29
實驗1-5 革蘭氏染色法 30
實驗1-6 細菌的抗酸性染色法 32
實驗1-7 細菌芽孢染色法 33
實驗1-8 鞭毛染色法及活細菌運動性的觀察 34
實驗1-9 莢膜染色法 36
實驗1-10 微生物擬核的體內和體外染色觀察 37
實驗1-11 細菌細胞壁的染色和質壁分離的觀察 39
實驗1-12 放線菌形態的觀察 40
實驗1-13 酵母菌形態及其子囊孢子的觀察 42
實驗1-14 黴菌形態及其接合孢子的觀察 44
實驗1-15 傘菌擔子及擔孢子形態的觀察 47
實驗1-16 昆蟲病毒多角體的觀察 48
第四單元 微生物純培養技術
實驗1-17 培養基的製備 50
實驗1-18 消毒與滅菌 53
實驗1-19 微生物接種技術 58
實驗1-20 微生物培養特徵的觀察與識別 62
實驗1-21 厭氧微生物的培養 66
實驗1-22 從土壤中分離與純化微生物 71
實驗1-23 顯微操縱單細胞分離技術 74
第五單元 微生物的生長
實驗1-24 微生物大小的測定 77
實驗1-25 顯微鏡直接計數法 79
實驗1-26 平板菌落計數法 82
實驗1-27 光電比濁計數法 84
實驗1-28 大腸埃希氏菌生長曲線的測定 85
實驗1-29 黴菌生長曲線的測定（乾重法） 87
實驗1-30 物理因素對微生物生長的影響 88
實驗1-31 化學因素對微生物生長的影響 91
實驗1-32 生物因素對微生物生長的影響 93
第六單元 細菌鑑定中常規生理生化反應
實驗1-33 用生長譜法測定微生物的營養要求 95
實驗1-34 唯一氮源（無機）試驗 96
實驗1-35 細菌鑑定中常用的生理生化反應 97
第七單元 分子微生物學基礎技術
實驗1-36 細菌質粒DNA的小量製備 102
實驗1-37 質粒DNA的轉化 105
實驗1-38 細菌總DNA的製備 107
實驗1-39 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定釀酒酵母菌胞外蛋白質相對分子質量 109
實驗1-40 微生物DNA的體外重組 112
實驗1-41 聚合酶鏈反應（PCR）技術 113
實驗1-42 核酸分子雜交 115
第八單元 免疫學技術
實驗1-43 免疫血清的製備 118
實驗1-44 凝集反應 122
實驗1-45 環狀沉澱反應 125
實驗1-46 雙向免疫擴散試驗 127
第二部分 微生物學綜合實驗
實驗2-1 微生物抗藥性突變株的分離 129
實驗2-2 微生物的誘變育種 131
實驗2-3 微生物的原生質體融合 133
實驗2-4 營養缺陷型突變株的誘變、篩選與鑑定 135
實驗2-5 細菌的接合作用 138
實驗2-6 噬菌體的分離、純化及其效價的測定 140
實驗2-7 動物病毒的雞胚培養 144
實驗2-8 芽孢桿菌屬（Bacillus）種的鑑定 146
實驗2-9 利用Biolog系統鑑定微生物 156
實驗2-10 微生物的快速、簡易檢測 158
實驗2-11 抗生素效價的測定 160
實驗2-12 產蛋白酶和澱粉酶芽孢桿菌的分離及酶活力檢測 162
第三部分 微生物學應用實驗
第一單元 微生物的分離、純化、篩選及保藏
實驗3-1 從病死蟲體內分離殺蟲微生物 165
實驗3-2 真菌的單孢子分離法 167
實驗3-3 嗜鹽細菌的分離與鑑定 169
實驗3-4 極端嗜鹽菌甘油二醚類衍生物的測定 170
實驗3-5 食用菌菌種的分離與選育 172
實驗3-6 細菌DNA中（G＋C）mol%值的測定 173
實驗3-7 菌種保藏 177
第二單元 食品、藥品、化妝品微生物學檢測
實驗3-8 食品中菌落總數及大腸菌群的檢測 184
實驗3-9 肉毒梭菌及肉毒毒素的檢測 188
實驗3-10 沙門氏菌屬的檢測 191
實驗3-11 志賀氏菌屬的檢測 195
實驗3-12 金黃色葡萄球菌的檢測 198
實驗3-13 食品中黴菌和酵母的計數 200
實驗3-14 食品中黴菌毒素的檢測 202
實驗3-15 罐頭食品商業無菌檢測 205
實驗3-16 牛奶中細菌的檢查 207
實驗3-17 藥品微生物限度檢查——細菌、黴菌及酵母菌計數 210
實驗3-18 微生物限度檢查方法——菌落計數法的驗證 212
實驗3-19 藥品的無菌檢查 215
實驗3-20 藥品中細菌內毒素的檢查（鱟試劑法） 218
實驗3-21 抗生素抗菌譜及抗生菌抗藥性的測定 222
實驗3-22 化妝品的微生物學檢驗 224
第三單元 微生物發酵技術
實驗3-23 固定化活細胞的製備及其發酵試驗 228
實驗3-24 微生物發酵培養基配方的正交試驗 231
實驗3-25 微生物搖瓶發酵條件的優選 237
實驗3-26 台式自控發酵罐的發酵試驗 241
實驗3-27 高密度培養——乳鏈球菌的膜過濾培養 245
實驗3-28 乳酸菌發酵製作酸奶及其分離純化 247
第四單元 環境微生物學檢測
實驗3-29 水的細菌學檢查 250
實驗3-30 利用發光細菌檢測水體生物毒性 253
實驗3-31 富營養化水體中藻類檢測（葉綠素a法） 256
實驗3-32 利用微生物吸附法去除水體中重金屬 258
實驗3-33 水中五日生化需氧量的測定 260
實驗3-34 微生物傳感器法測定BOD值 262
實驗3-35 用埃姆斯試驗檢測誘變劑和致癌劑 264
實驗3-36 空氣中微生物的檢測 270
主要參考文獻 274
附錄 275