植物生理學實驗教程（簡體書）

《全國高等學校“十二五”農林規劃教材：植物生理學實驗教程》是在多年的植物生理學實驗教學綜合改革基礎上編寫而成。全書包括實驗訓練綜合指導、72個實驗項目和附錄三部分。實驗訓練綜合指導主要介紹了植物生理實驗基本要求與常識；實驗項目涵蓋了細胞生理、水分生理、礦質營養、光合作用與呼吸作用、有機物代謝、生長物質、植物生長發育、逆境生理8個方面的基礎性與綜合性實驗及15個研究設計性實驗（含參考選題），涉及植物生理學的基本原理、基礎知識和基本實驗技能與綜合實踐應用。通過每章的“學習引導”，概括本章實驗技術的應用，引導各基礎性實驗的組合及綜合應用訓練；每個實驗後設有“學以致用”小欄目，激發學生興趣，啟發學生思考；通過每章思考與作業題，幫助學生理解並及時複習相應內容。《全國高等學校“十二五”農林規劃教材：植物生理學實驗教程》配有數字課程，其提供了教材相應內容的36個擴展實驗或相關知識，可供學生對不同方法進行比較和思考，也可為不同層次學生及不同條件的學校提供不同的教學選擇；同時提供了部分實驗教學錄像及多媒體課件和彩色照片；也為學生自學和開展科技創新性研究提供必要的參考資料。《全國高等學校“十二五”農林規劃教材：植物生理學實驗教程》可作為全國高等院校生物類及農學類等相關專業的本科生和研究生實驗教學指導教材，也可作為植物生理學相關科技工作者的研究參考書。

《全國高等學校"十二五"農林規劃教材:植物生理學實驗教程》可作為全國高等院校生物類及農學類等相關專業的本科生和研究生實驗教學指導教材，也可作為植物生理學相關科技工作者的研究參考書。

實驗訓練綜合指導一、實驗材料的處理與保存二、實驗數據的處理與分析三、實驗記錄與實驗報告（論文）的撰寫四、“三性”實驗及其實施原則五、實驗室安全本章思考與作業第1章細胞生理本章學習引導實驗1細胞色素氧化酶的組織化學鑒定實驗2酸性磷酸酯酶的組織化學鑒定實驗3三磷酸腺苷酶的組織化學鑒定實驗4植物肌動蛋白細胞骨架的熒光標記實驗5植物微管蛋白的免疫熒光染色實驗6熒光探針法檢測氣孔保衛細胞中的游離鈣本章思考與作業第2章水分生理本章學習引導實驗7植物組織自由水和束縛水含量的測定實驗8植物組織汁液濃度（可溶性固形物）的測定實驗9植物組織水勢的測定實驗10植物組織滲透勢的測定實驗11K+對氣孔運動的影響本章思考與作業第3章礦質營養本章學習引導實驗12植物的溶液培養及其缺素觀察實驗13植物根系活力的測定實驗14植物體內硝態氮的測定實驗15硝酸還原酶活力的測定實驗16原子吸收光譜法測定植物組織礦質元素本章思考與作業第4章光合作用與呼吸作用本章學習引導實驗17葉綠體色素含量的測定賣驗18葉綠體的分離及離體葉綠體對染料的還原作用（希爾反應）實驗19葉綠素熒光參數的測定實驗20類囊體膜蛋白複合體的分離與分析實驗21核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶活性測定實驗22磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶活性測定實驗23乙醇酸氧化酶活性測定實驗24葉綠體中甘油醛-3-磷酸脫氫酶活性測定實驗25氧電極法測定植物光合速率和呼吸速率本章思考與作業第5章有機物代謝本章學習引導實驗26還原糖含量測定實驗27可溶性蛋白質含量測定實驗28有機酸含量測定實驗29種子粗脂肪含量測定實驗30穀物種子賴氨酸含量測定實驗31植物組織總黃酮含量測定實驗32煙鹼含量測定實驗33植物組織ATP酶活性測定實驗34穀氨醯胺合成酶活性測定實驗35苯丙氨酸解氨酶活性測定本章思考與作業第6章生長物質本章學習引導實驗36植物激素的提取及純化實驗37植物激素的酶聯免疫測定實驗38液相色譜法測定生長素含量實驗39氣相色譜法測定乙烯含量實驗40植物內源激素脫落酸和赤黴素的提取、分離及測定實驗41赤黴素誘導a-澱粉酶的合成本章思考與作業第7章植物生長發育本章學習引導實驗42花粉活力測定實驗43種子生活力快速測定實驗44穀物種子萌發時澱粉酶活力的測定實驗45愈傷組織的形成與分化本章思考與作業第8章逆境生理本章學習引導實驗46電導儀法測定植物細胞質膜透性實驗47游離脯氨酸含量測定實驗48丙二醛含量測窟實驗49超氧化物歧化酶活性測定實驗50過氧化物酶活性測定實驗51過氧化氫酶活性測定實驗52多酚氧化酶活性測定實驗53過氧化氫含量測定實驗54超氧陰離子含量測定實驗55還原型谷胱甘肽含量測定實驗56還原型抗壞血酸含量測定實驗57膜脂脂肪酸含量測定本章思考與作業第9章研究設計性實驗本章學習引導實驗58植物缺素培養的形態觀察及其生理代謝分析實驗59植物對低溫脅迫生理適應的研究實驗60CaCI：在提高作物抗旱性中的作用實驗61不同種作物光合能力的比較研究實驗62外源激素對植物幼苗生長及抗冷性影響的研究實驗63不同抗性作物品種苗期耐逆性的篩選鑒定實驗64逆境脅迫對作物幼苗抗氧化酶影響的研究實驗65逆境脅迫對作物幼苗脯氨酸代謝影響的研究實驗66外界因素對植物葉片氣孔運動的調節（參考選題）實驗67外界因素調控種子萌發的研究（參考選題）……附錄1試劑的配製附錄2硫酸銨飽和度常用表附錄3實驗中常用酸、堿的相對密度和濃度的關係附錄4常用有機溶劑及其主要性質附錄5常用酸、堿指示劑附錄6植物組織培養常用培養基附錄7常見的植物生長調節物質及其主要性質附錄8植物激素與生長調節劑在農業生產中的應用附錄9常用緩衝溶液的配製附錄10離心機轉速與離心力的換算參考文獻

（2）透析
透析用于分離大小不同的分子，是膜分離技術的一種。透析膜只允許小分子通過，阻止大分子通過。鹽析得到的蛋白質沉淀，用緩沖液懸浮，裝入透析袋內進行脫鹽，可除去硫酸銨等鹽類。具體方法是：把盛有蛋白質溶液的透析袋兩端系緊，懸掛在裝有緩沖液的三角瓶中，置磁力攪拌器上，在低溫（4℃左右）條件下透析30～36 h，由于透析袋只允許小分子鹽類透過，而蛋白質大分子不能逸出膜外，經多次更換透析外液，不斷降低膜外液中小分子鹽類的濃度，即可將混雜于蛋白質大分子中的鹽類等雜質透析掉。透析時，要選用透析速度快、透性界限明確的透析袋。
3.濃縮與干燥
（1）濃縮
濃縮是指通過對水或溶劑的吸收和透析等方法，使低濃度溶液變為高濃度溶液的過程。濃縮的方法很多，如加熱蒸發、加沉淀劑、離子交換法、吸收法、減壓濃縮法、膜濃縮法、親和層析法等。在實驗室中最常用的是吸收濃縮法，即通過向溶液中投入吸收劑（如聚乙二醇、聚丙烯酰胺干凝膠等），直接吸收溶液中的水分，使溶液濃縮的方法。在使用吸收劑時，也可先將生物大分子溶液裝入透析袋里，扎緊袋口，外加聚乙二醇覆蓋，袋內水分滲出，即被聚乙二醇迅速吸收而被濃縮，稱為高滲透析法，兼有脫鹽效果。在實驗室中也經常用到超濾法，即使用一種特制的薄膜對溶液中各種溶質分子進行選擇性過濾的方法。應用超濾法，關鍵在于濾膜類型和規格的選擇。該法除濃縮、脫鹽外，還可應用于生物大分子的分離純化，如進行多成分提取液的分離時，可先用超濾器分組，再進行柱層析，可將多種待測組分分離。
此外，也常用減壓濃縮法對不耐熱的生物大分子及生物制品進行濃縮，其原理是通過降低液面上的氣體壓力使液體沸點降低，加快蒸發。
（2）干燥
干燥就是將潮濕的固體及液體中的水或溶劑清除干凈的過程。在生化研究中最常用的干燥方法是真空干燥法（減壓干燥法）和冰凍真空干燥法（升華干燥法）。前者適用于不耐高溫、易氧化物質的干燥和保存，其真空度越高，溶液沸點越低，蒸發越快；后者適用于蛋白質、酶等各類生物大分子的干燥保存，可保持其天然結構與活力。在相同壓力下，水蒸氣壓力隨溫度的下降而下降，因而在低溫和高度真空下，水分變成固態冰，冰可以升華為氣體，并直接被真空泵抽走而得以干燥。
4.待測組分的測定
樣品中待測組分的測定可采用化學分析、物理分析等方法，而現代植物生理生化實驗則更依賴于儀器分析方法。這就要求待測樣品在上機之前，需進行一些特殊處理，提供特異信號，使儀器做出反應。如比色技術、色譜技術等，多以化學變化過程中待測組分與試劑反應發生顏色的消長，通過儀器檢測得知某組分的含量。其中像茚三酮比色法測定氨基酸含量，就是利用氨基酸在酸性條件下與水合茚三酮作用后產生的二酮茚胺的取代鹽等藍紫色化合物，在一定范圍內其顏色的深淺與氨基酸的含量成正比的原理來進行。