藥品微生物檢驗技術（簡體書）

《全國醫藥高等職業教育藥學類規劃教材：藥品微生物檢驗技術》是依照教育部教育發展規劃綱要等相關文件要求，根據‘藥品微生物檢驗技術）教學大綱編寫而成。
《全國醫藥高等職業教育藥學類規劃教材：藥品微生物檢驗技術》主要內容包括微生物學基礎知識和操作技能、藥品生產環境的微生物檢測、實用藥品微生物檢驗技術三個模塊和附錄。具體包括微生物顯微觀察技術、配製培養基、消毒和滅菌、分離純化和培養微生物、微生物生長的測定、菌種保藏、醫藥工業潔淨室（區）中空氣潔淨級別的檢測、滅菌藥物的無菌檢驗、藥品中微生物總數的檢查、藥品的控制菌及蟎類檢查、抗生素效價的微生物檢定、藥品中熱原的檢查、測定細菌內毒索。
《全國醫藥高等職業教育藥學類規劃教材：藥品微生物檢驗技術》編寫中注重學習內容與企業工作崗位任務的一致性，並嚴格依據GMP和《中國藥典》。
《全國醫藥高等職業教育藥學類規劃教材：藥品微生物檢驗技術》供藥學及其相關專業高職層次教學使用，也可作為醫藥行業培訓和自學用書。

《全國醫藥高等職業教育藥學類規劃教材:藥品微生物檢驗技術》編寫中注重學習內容與企業工作崗位任務的一致性，并嚴格依據GMP和《中國藥典》。《全國醫藥高等職業教育藥學類規劃教材:藥品微生物檢驗技術》供藥學及其相關專業高職層次教學使用，也可作為醫藥行業培訓和自學用書。

模塊一微生物學基礎知識和操作技能
緒論
一、微生物及其與人類的關係
二、微生物檢驗概述
三、微生物檢驗工作流程與質量控制
四、微生物檢測實驗室的設施與設備
項目一微生物顯微觀察技術
一、顯微鏡的結構及其使用方法
二、微生物的類型及其形態結構
三、染色觀察技術
實訓一細菌的形態結構觀察
實訓二放線菌的形態結構觀察
實訓三黴菌的形態結構觀察
實訓四酵母菌的形態結構觀察
項目二配製培養基
一、微生物的營養要素及其功能
二、培養基的分類
三、培養基的配製方法
實訓配製營養肉湯培養基
項目三消毒和滅菌
一、消毒滅菌的基本概念
二、常用的消毒劑
三、常用的滅菌方法
實訓一微生物檢驗用玻璃器皿的幹熱滅菌技術
實訓二培養基高壓蒸汽滅菌
實訓三微生物檢驗中無菌室及超淨台使用前的消毒和滅菌
實訓四自來水的過濾除菌
項目四分離純化和培養微生物
一、菌種分離純化技術
二、接種工具及操作技術
三、微生物的培養方法
實訓從混菌中分離純化金黃色葡萄球菌
項目五微生物生長測定
一、微生物的生長和繁殖
二、微生物生長的測定
實訓微生物生長的測定
項目六保藏菌種
一、菌種的遺傳和變異
二、菌種保藏的原理和方法
實訓常用的菌種保藏方法

模塊二藥品生產環境的微生物檢測
項目七醫藥工業潔淨室（區）中空氣潔淨級別的檢測
一、空氣潔淨度標準
二、空氣潔淨度測定有關概念
三、潔淨室（區）懸浮粒子的測試方法
四、潔淨室（區）沉降菌的測試方法
實訓潔淨工作臺沉降菌測試

模塊三實用藥品微生物檢驗技術
項目八滅菌藥物的無菌檢驗
一、無菌檢查概述
二、培養基的製備及其適用性檢查
三、方法驗證試驗
四、供試品的無菌檢查
五、無菌檢驗標準操作規程（s0P）樣例
實訓一維生素B12注射劑的無菌檢查
實訓二青黴素鈉注射液的無菌檢查
項目九藥品中微生物總數的檢查
一、藥品微生物總數檢查的要求和一般步驟
二、供試液的製備
三、試驗菌株及菌液製備
四、培養基的製備及其適用性檢查
五、計數方法的驗證
六、供試品微生物總數的檢查
實訓一葡萄糖酸鈣口服溶液的微生物總數檢查
實訓二雙黃連口服液的微生物總數檢查
實訓三更年寧微生物總數檢查方法驗證
項目十藥品的控制菌及蟎類檢查
一、控制菌檢查概述
二、培養基適用性檢查
三、方法驗證
四、藥品中大腸埃希茵檢查
五、藥品中大腸菌群檢查
六、藥品中沙門菌檢查
七、藥品中銅綠假單胞菌檢查
八、藥品中金黃色葡萄球菌檢查
九、藥品中梭菌檢查
十、藥品中白色念珠菌檢查
十一、活蟎檢查
實訓一葡萄糖酸鈣口服溶液中大腸埃希菌檢查
實訓二甲硝唑陰道泡騰片中銅綠假單胞菌檢查
實訓三蒲地藍消炎顆粒微生物限度檢查
項目十一抗生素效價的微生物檢定
一、抗生素的效價
二、抗生素微生物檢定用標準品
三、抗生素微生物檢定法
實訓紅黴素注射劑效價的微生物測定
項目十二藥品中熱原的檢查
一、熱原
二、熱原的理化性質
三、熱原的檢查方法
四、家兔升溫為負值的可能情況及措施
五、熱原檢查法的特點和發展現狀
實訓維生素c注射液中熱原的檢查
項目十三測定細菌內毒素
一、細菌內毒素概述
二、細菌內毒素檢查原理及方法
三、細菌內毒素檢查用具和器材
四、檢查前準備工作
五、鱟試劑靈敏度複核試驗
六、干擾試驗
七、檢查方法
八、注意事項
實訓5％葡萄糖注射液的細菌內毒素檢查

附錄
附錄一藥品生物檢定實驗常用器皿及預處理方法
一、藥品生物檢定實驗的常用器皿
二、玻璃器皿的清洗方法
三、玻璃器皿的包紮
四、玻璃器皿的滅菌
五、常用洗滌液的配製
附錄二常用培養基
附錄三微生物限度標準
《中華人民共和國藥典》一部微生物限度標準
《中華人民共和國藥典》二部微生物限度標準
附錄四抗生素微生物檢定試驗設計表

（1）試驗前的準備
①無菌室內應準備好消毒溶液、乙醇燈、火柴、鑷子、75％乙醇棉、記號筆等。
②供試品在移入緩沖間前應除去外包裝、消毒外表面并編號。
③將已滅過菌的注射器及針頭，15ml硫乙醇酸鹽流體培養基11管培養基管，10ml改良馬丁培養基10管，經外包裝消毒后，連同其他用具（包括無菌衣、帽、口罩等）移入緩沖間。
④開啟操作間紫外燈和空氣過濾裝置并使其工作1h以上。
⑤操作人員用肥皂、水清洗雙手，關閉紫外光燈，進入緩沖間，換拖鞋，再用75％乙醇棉球擦手，穿戴衣、帽、口罩、手套。將所需物品剝去牛皮紙，移入無菌間，每次試驗中所用物品必須計劃好，并有備用物品。
（2）供試品的制備在無菌室內，先用75％乙醇或碘仿棉球擦試供試品內包裝外壁及瓶塞，待干，以無菌的方式取內容物，制成一定濃度的供試品溶液。
①當供試品為粉針劑，瓶蓋為橡膠塞時，用注射器吸取規定的溶劑，在已消毒好的橡膠塞中心位置刺人小瓶加入溶劑，溶解，混勻后吸出溶液，或選用其他適宜的方法制成一定濃度的供試品溶液。
②如為注射液、供角膜創傷及手術用的滴眼劑或滅菌溶液等可用注射器吸取藥液，或選用其他適宜的方法制成一定濃度的供試品溶液。
③按規定或需滅活的供試品可用滅活劑溶解，將瓶內供試液抽出稀釋至規定的濃度。
④供試品如為注射用無菌粉末的原料藥（大包裝粉針劑），為縮短取樣時的暴露時間，應由兩人按無菌操作開啟容器取出內容物，再用適當溶劑制成一定濃度的供試品溶液。
注意：供試品處理時所用的溶劑、乳化劑、分散劑、中和劑（滅活劑）及其用量應驗證是有效的，并對微生物生長無影響。
⑤抗菌類藥物及含防腐劑藥物，即有抑菌作用的供試品，可先用中和法、滅活法或稀釋法使其不再具有抑菌作用，再用直接接種法檢查。
中和法（滅活法）：在培養基中加人合適的中和劑，使藥物不再具有抑菌作用，或抑菌作用可以忽略不計，如對青霉素藥物進行無菌檢查時，常在培養基中加入中和劑青霉素酶。中和劑本身必須對微生物沒有毒性，同時滅活劑與抗菌藥物相互作用的產物對微生物也沒有毒性。滅活劑的中和作用必須迅速而完全。
稀釋法：有些供試品有抑菌作用或含有抑菌作用的物質而沒有適當的中和劑，可加入較大量的培養基，使供試品稀釋至不具抑菌作用的濃度即可。
檢查。