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基因工程(簡體書)
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商品簡介

目次

本書按照基因工程的技術路線對基因工程的技術基礎、基因克隆載體、目的基因的克隆、重組DNA導人受體細胞、克隆子的篩選與表達產物的檢測及基因工程的應用與安全性問題等內容作了簡要系統的介紹。全書共分九章,第一章介紹了基因工程含義、主要操作內容、技術路線、發展歷程及其意義。第二章介紹了基因工程的技術基礎。第三章介紹了基因的克隆和分離理論,包括基因分離克隆的基本步驟、cDNA文庫的構建與目的cDNA 克隆的篩選、基因組DNA克隆技術等。第四章介紹了基因克隆的載體,主要包括質粒載體、噬菌體載體、黏粒載體、M13載體和表達型載體等。第五章介紹了目的基因導入受體細胞,包括受體細胞的概念及其選擇的原則,重組DNA轉化技術和重組子的篩選技術。第六章介紹了外源基因的表達,包括外源基因的表達和調控機制、幾類外源基因表達系統及表達產物的檢測與分離純化等。第七章、第八章介紹了基因工程的應用和基因工程的爭論與安全措施。第九章是基因工程基本實驗實訓,包括DNA和RNA的提取、分離和定量分析,目的基因的PCR擴增,目的基因與載體連接與檢測,感受態細菌的制備,重組DNA的轉化及核酸探針制備與Southern印跡雜交。通過這些實驗實訓,可以使學生掌握基因工程基本實驗技能,加深對基本理論和基本知識的理解。
本書的理論知識部分,概念表述準確、內容簡明扼要、結構緊湊有序,脈絡清晰;實驗部分,應用性、實用性和操作性強,內容由簡到繁、循序漸進,注重學生動手能力和思維能力培養,為學生畢業后進人生物技術高新科技產業奠定基礎。
本書適用于全國高職高專院校、成教學院的生物技術、生物製藥、醫學、食品加工、畜牧獸醫、農藝、園林園藝等專業的教學和培訓,也可作為農、林、師範院校生物類本科專業教學、科研的參考用書。
前言
第一章 緒論
一、基因及基因工程含義
二、基因工程理論依據
三、基因工程研究的主要操作內容和技術路線
四、基因工程的發展歷程
五、基因工程的巨大意義及我國在該領域取得的成就
復習思考題
第二章 基因工程的技術基礎
第一節 限制性內切酶
一、限制性內切酶的分類
二、限制性內切酶的命名及其識別特點
三、限制性內切酶的切割方式
四、限制性內切酶產生的末端的連接
五、限制性內切酶反應的影響因素
第二節 工具酶
一、DNA聚合酶
二、末端脫氧核苷酸轉移酶
三、T4多聚核苷酸激酶
四、堿性磷酸酶
五、核酸酶
六、DNA連接酶
第三節 DNA序列分析
一、Maxam-Gilbert化學法
二、Sanger的雙脫氧法
三、自動測序的發展
第四節 寡核苷酸的合成
一、寡核苷酸的生物合成
二、寡核苷酸的化學合成
三、DNA化學合成的應用
第五節 聚合酶鏈式反應技術
一、聚合酶鏈式反應的原理
二、PCR的反應條件
三、Ta DNA聚合酶與PCR擴增的精確性
四、PCR的模板
五、PCR的引物
六、PCR擴增產物的電泳分析
七、PCR產物克隆方法
八、PCR應用中存在的問題與解決方法
九、PCR技術的新進展
第六節 DNA片段的連接重組
一、DNA片段之間的連接
二、DNA重組類型
復習思考題
第三章 基因的克隆和分離
第一節 基因分離和克隆的基本步驟
一、選擇含目的基因的材料
二、DNA片段的制備和克隆
三、目的基因的篩選
第二節 cDNA文庫的構建

一、cDNA合成
二、獲取全長cDNA
三、將cDNA重組到載體上
第三節 目的cDNA克隆的篩選
一、用核酸探針篩選目的cDNA
二、用寡核苷酸探針篩選目的cDNA
三、差示篩選組織特異的cDNA
四、用抗體篩選目的cDNA
五、功能結合法篩選目的cDNA
六、cDNA序列測定
第四節 基因組DNA克隆
一、制備用于克隆的DNA片段
二、構建基因組文庫的克隆載體
三、染色體步移法分析長片段真核基因
復習思考題
第四章 基因工程載體
第一節 質粒載體
一、質粒載體的生物學特性
二、插入失活
三、轉化
四、常見的質粒載體類型
第二節 基於入噬菌體的載體
一、λ噬菌體的生物學
二、λ噬菌體載體
第三節 黏粒載體
一、柯斯質粒的特點
二、大分子DNA克隆載體:YACs與BACs
第四節 M13載體
一、絲狀大腸桿菌噬菌體的生物學
二、M13噬菌體的基因組結構
三、M13噬菌體的主要用途
第五節 表達型載體
一、表達載體的類型
二、表達載體構建的一般原則
第六節 真核細胞中的基因克隆與表達載體
一、酵母
二、哺乳動物細胞
復習思考題
第五章 目的基因導入受體細胞
第一節 受體細胞
一、受體細胞的概念及其選擇的原則
二、幾類受體細胞概述
第二節 重組DNA分子轉入原核生物細胞
一、重組質粒DNA分子轉化大腸桿菌
二、重組λ噬菌體DNA分子轉導大腸桿菌
三、受體細胞的選擇
四、重組DNA分子轉入真核細胞
第三節 重組子的篩選
一、遺傳表型直接篩選法
二、依賴于重組子結構特征分析的篩選法

三、核酸分子雜交檢測法
四、免疫化學檢測法
五、轉譯篩選法
六、插入失活法
七、基因表達產物分析法
復習思考題
第六章 外源基因的表達
第一節 外源基因的表達機制
一、外源基因的起始轉錄
二、mRNA的延伸與穩定性
三、外源基因mRNA的有效翻譯
四、表達蛋白在細胞中的穩定性
五、目的基因沉默
第二節 基因表達的調控元件
一、啟動子
二、增強子
三、終止子
四、衰減子
五、反義RNA
第三節 外源基因表達系統
一、大腸桿菌基因表達系統
二、酵母表達系統
三、哺乳動物細胞基因表達系統
四、植物細胞基因表達系統
第四節 基因表達產物的檢測與分離純化
一、基因表達產物的檢測
二、基因表達產物的分離純化
復習思考題
第七章 基因工程的應用
第一節 基因工程藥物
一、基因工程激素類藥物
二、基因工程細胞因子類藥物
三、基因工程抗體
四、基因工程受體
五、基因工程疫苗
第二節 轉基因植物
一、抗病蟲害轉基因植物
二、抗逆轉基因植物
三、藥用轉基因植物
四、轉基因植物食品
五、其他轉基因植物
第三節 轉基因動物
一、利用轉基因動物改良動物品種
二、轉基因動物作為生物反應器
三、轉基因動物篩選藥物
四、轉基因動物應用于人體器官移植
第四節 基因治療
一、腫瘤的基因治療
二、分子遺傳病的基因治療
三、心血管病的基因治療

四、病毒病的基因治療
第五節 人類基因組計劃
一、疾病與基因
二、人類基因組研究計劃
三、人類基因組研究進展與展望
第六節 基因芯片技術及應用
一、基因芯片技術
二、基因芯片的應用
復習思考題
第八章 基因工程的爭論和安全措施
第一節 基因工程的安全隱患及其爭論
一、基因工程的安全隱患
二、對基因工程的爭論
第二節 基因工程安全措施
第三節 我國生物技術發展及其安全問題
復習思考題
第九章 基因工程實驗實訓指導
實驗一 大腸桿菌pBR322質粒DNA提取
實驗二 植物總RNA的提取
實驗三 核酸提取物的定量分析
實驗四 利用瓊脂糖凝膠分離DNA片段
實驗五 目的基因的PCR擴增
實驗六 目的基因與載體的限制性內切酶酶切、連接與檢測
實驗七 感受態菌的制備
實驗八 重組DNA的轉化
實驗九 隨機引物法制備核酸探針
實驗十 Southern印跡雜交
附錄
附錄1 常用的測量單位及換算
附錄2 常用的限制性內切酶的主要性質及緩沖液
附錄3 常用抗生素配制及使用濃度
附錄4 主要溶液(母液)及緩沖液配制
附錄5 部分重要的生物信息學網絡資源
主要參考文獻

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