化學品測試方法：降解蓄積卷(第2版)（簡體書）

將準備好的試驗瓶在35℃±2℃條件下培養1h，以使其達到平衡并釋放多余的氣體，例如按順序搖動每個試驗瓶，將壓力測定計的針插入密封口，調節閥門直到壓力計的讀數為零。如果在這一階段或在測定階段中間，頂空壓力小于大氣壓，這時需加入氮氣使其重新恢復到大氣壓。關掉閥門繼續在黑暗處培養，確保整個試驗瓶保持在消化溫度。培養24～48h觀察試驗瓶。如果試驗瓶中的上層液體有明顯的粉色出現（刃天青的顏色變化指示有氧存在），丟棄該試驗瓶。測試系統中可以忍受少量氧，但高濃度的氧會嚴重干擾厭氧生物降解過程。在一系列3個平行試驗中，偶爾棄去單個試驗瓶是可以接受的，但若出現更多的失敗就要對操作過程進行檢查，同時重新進行試驗。
小心混合每個樣品瓶中的內容物或每周至少搖動2～3次，每次搖動幾分鐘，并在每次測定壓力前快速搖動。搖動會使接種物再次懸浮并保證氣體的平衡。所有的壓力測定應快速進行，因為試驗瓶會受到更低溫度的影響而導致錯誤的讀數。當測定壓力時，整個試驗瓶包括頂空部分應保持在消化溫度下。壓力測定時，例如通過針頭將試驗瓶與壓力測定計連接起來，要特別小心不要讓水進入到針頭中；如果發生了這種情況，應干燥濕的部分并換上一個新的針頭。壓力應用毫巴測定（見4.1）。試驗瓶的氣體壓力可定時（如每周）測定，多余氣體釋放到大氣中。壓力也可以只在試驗結束時測定，來測定產生的沼氣的量。推薦在試驗中間讀取氣體壓力數值，因為通過壓力的增加可判斷試驗結束的時間并可進行動力學研究。
通常在培養60d后結束試驗。如果在60d之前受試物已達到最大的生物降解，且生物降解曲線已變平，可以提前結束。如果穩定值小于60%是有問題的。因為這表明只有部分的分子被礦化或者試驗出現了問題。如果在正常的培養階段末期，產生了氣體但是明顯沒有達到穩定值，這就需要延長試驗來檢查穩定值（>60%）是否能達到。
3.2.4無機碳測定
在試驗結束時，最后一次測定氣體壓力后，讓污泥沉降。按順序打開每個試驗瓶并立即取樣測定上清液的無機碳濃度（mg/L）。對上清液既不能離心分離也不能過濾，因為這會損失大量溶解的C02。如果液體不能在取樣時分析，把它保存在密閉的小瓶內，在小瓶中不能留有空隙，在4℃下最多貯存2d。在測定無機碳后，測定并記錄pH值。也可以選擇間接方法測定上清液無機碳，通過將溶解的無機碳轉化成C02然后測定頂空壓力。最后一次測定氣體壓力之后，調節每個試驗瓶的壓力至大氣壓。穿過氣密墊向密閉瓶中加濃的無機酸（如H2S04），酸化內容物并使pH值降至l左右。在35℃±2℃的條件下，搖瓶培養約24h，用壓力計測定由于釋放C02而產生的壓力。