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生物檢測技術（簡體書）
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目次
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以現代生物工程技術為核心，闡述生物過程及產品的理化及功能的分析檢測手段和方法。如基因及基因組學、蛋白及蛋白組學、次生產物有效成分、酶、細胞、功效及毒理和代謝的分析檢測。具有較強的集成性和實用性，既能為讀者的日常工作提供方便，又能為讀者從事科學研究提供指導和思路。
名人/編輯推薦
生物檢測是近年來高速發展的學科之一，其概念和范圍也在不斷變化。狹義的生物檢測技術是利用生物體對被檢測物質的特有反應而鑒定被檢物質的質量和功效的方法，其所用生物體主要是各種微生物和某些動物，檢測的范圍主要是生物效價測定和安全性的試驗。
《生物檢測技術》(作者陳朝銀、趙聲蘭)是在十多屆本科生和研究生使用的生物檢測技術講義的基礎上陸續修訂而成。全書共8章，闡述了各生物檢測技術的基本原理、基礎理論和基本技術，內容系統、新穎，具有較強的集成性和實用性，既能為讀者的日常工作提供方便，又能為讀者從事科學研究提供指導和思路。本書可以作為相關專業的本科生、研究生的教材和教學參考書，也可作為相關科研和教學工作者的參考用書。
《生物檢測技術》(作者陳朝銀、趙聲蘭)是在十多屆本科生和研究生使用的生物檢測技術講義的基礎上陸續修訂而成。全書共8章，闡述了各生物檢測技術的基本原理、基礎理論和基本技術，內容系統、新穎，具有較強的集成性和實用性，既能為讀者的日常工作提供方便，又能為讀者從事科學研究提供指導和思路。本書可以作為相關專業的本科生、研究生的教材和教學參考書，也可作為相關科研和教學工作者的參考用書。
目次
前言
第1章基因及基因組學檢測技術
1.1核酸制品的理化指標及其檢測
1.1.1核酸分離純化的原則
1.1.2核酸分離純化的技術路線
1.1.3基因組DNA的分離與純化
1.1.4質粒DNA的分離與純化
1.1.5 RNA的分離與純化
1.1.6全自動核酸提取純化工作站
1.2 DNA的變性與復性及其Tm值和Cot值測定
1.2.1 DNA變性及其Tm值的意義與測定
1.2.2.DNA復性及其Cot值的意義和測定
1.2.3核酸雜交分析及核酸探針技術
1.3常規PCR原理與步驟
1.3.1 PCR的基本原理
1.3.2操作過程
1.3.3熱穩定性DNA聚合酶
1.3.4 PCR引物的設計
1.3.5 PCR擴增的模板
1.3.6常規的PCR擴增方案
1.4實時熒光定量PCR檢測技術
1.4.1 CT值
1.4.2熒光信號和定量數據的歸一化
1.4.3污染的預防和熱啟動
1.4.4標準
1.4.5 TaqMan探針技術原理
1.4.6 SYBR Green Ⅰ熒光染料
1.4.7定量PCR儀
1.5其他非常規擴增技術
1.6核酸的序列測定技術
1.6.1雙脫氧末端終止法測序
1.6.2全自動測序
1.6.3測序策略
1.6.4高通量測序
1.7基因組學檢測技術
1.7.1結構基因組學檢測技術
1.7.2功能基因組學檢測技術
1.7.3比較基因組學檢測技術
1.7.4宏基因組學檢測技術
主要參考文獻
第2章蛋白質及蛋白質組學檢測技術
2.1蛋白質的理化性質
2.2蛋白質一級結構測定
2.2.1水解分析
2.2.2蛋白質分子中末端氨基酸的分析
2.2.3質譜測序
2.2.4蛋白質的非共價復合物研究
2.3蛋白質高級結構分析測定
2.3.1儀器分析方法
2.3.2理論分析方法
2.4蛋白質組學檢測技術
2.4.1電泳分析法
2.4.2層析技術
2.4.3質譜技術
2.4.4蛋白質修飾及其分析方法
主要參考文獻
第3章酶檢測技術
3.1基礎酶學檢測技術
3.1.1酶反應的解析
3.1.2酶學常數測定
3.2應用酶學檢測技術
3.2.1酶產品質檢
3.2.2酶法檢測
3.2.3常見酶活力測定方法
主要參考文獻
第4章次生活性成分檢測技術
4.1生物堿
4.1.1生物堿的分類
4.1.2生物堿的理化性質
4.1.3生物堿的提取分離
4.1.4生物堿定性鑒別
4.1.5生物堿的含量測定
4.2醌類化合物
4.2.1醌類化合物的主要理化特性
4.2.2醌類化合物的提取分離
4.2.3醌類化合物的定性鑒別
4.2.4醌類化合物的含量測定
4.2.5蒽醌類化合物的結構測定
4.3黃酮類化合物
4.3.1黃酮類化合物的主要理化特性
4.3.2黃酮類化合物的分離
4.3.3黃酮類化合物的定性鑒別
4.3.4黃酮類化合物的定量分析
4.4香豆素和木脂素類
4.4.1香豆素類成分的主要理化性質
4.4.2香豆素類的提取分離
4.4.3香豆素類的檢識
4.4.4木脂素類的理化性質
4.4.5木脂素類的提取分離
4.4.6木脂素類的檢識
4.5皂苷類
4.5.1皂苷的性質
4.5.2皂苷的提取分離
4.5.3皂苷類成分的定性分析
4.5.4皂苷類成分的定量分析
4.6強心苷類
4.6.1強心苷類的主要性質
4.6.2強心苷類的檢識反應
4.6.3強心苷類的提取分離
4.7揮發油
4.7.1揮發油的主要性質
4.7.2揮發油成分的提取
4.7.3揮發油成分的分離
4.7.4揮發油的鑒定
4.8抗生素
4.8.1抗生素的種類
4.8.2抗生素的效價測定
主要參考文獻
第5章細胞分析檢測技術
5.1細胞的分離與培養
5.1.1細胞培養技術的特點與應用
5.1.2培養細胞生長的條件
5.1.3原代培養細胞的取材與分離
5.2細胞形態與活性的常規檢測法
5.2.1普通顯微染色觀察法
5.2.2 MTT法
5.3數字顯微及激光共聚焦顯微分析法
5.3.1數字顯微分析法
5.3.2激光掃描共聚焦顯微觀察分析法
5.4流式細胞術檢測技術
5.4.1流式細胞術的發展簡史
5.4.2流式細胞術的基本結構和工作原理
5.4.3流式細胞術的應用
主要參考文獻
第6章功效與代謝檢測技術
6.1保健食品功效檢測與評價
6.1.1保健食品概述
6.1.2保健食品功能檢測
6.2藥理檢測技術
6.2.1藥效學檢測技術
6.2.2藥物代謝動力學檢測技術
主要參考文獻
第7章生物安全評價方法與技術
7.1生物安全性評價基本方法
7.1.1急性毒性試驗
7.1.2蓄積毒性試驗
7.1.3亞急性毒性試驗
7.1.4慢性毒性試驗
7.1.5致癌試驗
7.1.6致突變試驗
7.1.7代謝試驗
7.2各主要制品生物安全性評價
7.2.1食品安全性評價
7.2.2藥物毒理及安全性評價
7.2.3化妝品毒理及安全性評價
7.2.4轉基因產品的安全性評價
7.3質量安全認證
7.3.1 HACCP認證
7.3.2 GMP認證
7.3.3 Qs認證
7.3.4其他與生物技術產品相關的認證
主要參考文獻
第8章生物傳感器及生物芯片技術
8.1生物傳感器
8.1.1生物傳感器的結構和原理
8.1.2生物傳感器的定義與分類
8.1.3幾種主要的生物傳感器
8.2生物芯片
8.2.1生物芯片的制造
8.2.2生物芯片的使用和閱讀
8.2.3各種生物芯片
8.2.4生物芯片的應用
主要參考文獻
第1章基因及基因組學檢測技術
1.1核酸制品的理化指標及其檢測
1.1.1核酸分離純化的原則
1.1.2核酸分離純化的技術路線
1.1.3基因組DNA的分離與純化
1.1.4質粒DNA的分離與純化
1.1.5 RNA的分離與純化
1.1.6全自動核酸提取純化工作站
1.2 DNA的變性與復性及其Tm值和Cot值測定
1.2.1 DNA變性及其Tm值的意義與測定
1.2.2.DNA復性及其Cot值的意義和測定
1.2.3核酸雜交分析及核酸探針技術
1.3常規PCR原理與步驟
1.3.1 PCR的基本原理
1.3.2操作過程
1.3.3熱穩定性DNA聚合酶
1.3.4 PCR引物的設計
1.3.5 PCR擴增的模板
1.3.6常規的PCR擴增方案
1.4實時熒光定量PCR檢測技術
1.4.1 CT值
1.4.2熒光信號和定量數據的歸一化
1.4.3污染的預防和熱啟動
1.4.4標準
1.4.5 TaqMan探針技術原理
1.4.6 SYBR Green Ⅰ熒光染料
1.4.7定量PCR儀
1.5其他非常規擴增技術
1.6核酸的序列測定技術
1.6.1雙脫氧末端終止法測序
1.6.2全自動測序
1.6.3測序策略
1.6.4高通量測序
1.7基因組學檢測技術
1.7.1結構基因組學檢測技術
1.7.2功能基因組學檢測技術
1.7.3比較基因組學檢測技術
1.7.4宏基因組學檢測技術
主要參考文獻
第2章蛋白質及蛋白質組學檢測技術
2.1蛋白質的理化性質
2.2蛋白質一級結構測定
2.2.1水解分析
2.2.2蛋白質分子中末端氨基酸的分析
2.2.3質譜測序
2.2.4蛋白質的非共價復合物研究
2.3蛋白質高級結構分析測定
2.3.1儀器分析方法
2.3.2理論分析方法
2.4蛋白質組學檢測技術
2.4.1電泳分析法
2.4.2層析技術
2.4.3質譜技術
2.4.4蛋白質修飾及其分析方法
主要參考文獻
第3章酶檢測技術
3.1基礎酶學檢測技術
3.1.1酶反應的解析
3.1.2酶學常數測定
3.2應用酶學檢測技術
3.2.1酶產品質檢
3.2.2酶法檢測
3.2.3常見酶活力測定方法
主要參考文獻
第4章次生活性成分檢測技術
4.1生物堿
4.1.1生物堿的分類
4.1.2生物堿的理化性質
4.1.3生物堿的提取分離
4.1.4生物堿定性鑒別
4.1.5生物堿的含量測定
4.2醌類化合物
4.2.1醌類化合物的主要理化特性
4.2.2醌類化合物的提取分離
4.2.3醌類化合物的定性鑒別
4.2.4醌類化合物的含量測定
4.2.5蒽醌類化合物的結構測定
4.3黃酮類化合物
4.3.1黃酮類化合物的主要理化特性
4.3.2黃酮類化合物的分離
4.3.3黃酮類化合物的定性鑒別
4.3.4黃酮類化合物的定量分析
4.4香豆素和木脂素類
4.4.1香豆素類成分的主要理化性質
4.4.2香豆素類的提取分離
4.4.3香豆素類的檢識
4.4.4木脂素類的理化性質
4.4.5木脂素類的提取分離
4.4.6木脂素類的檢識
4.5皂苷類
4.5.1皂苷的性質
4.5.2皂苷的提取分離
4.5.3皂苷類成分的定性分析
4.5.4皂苷類成分的定量分析
4.6強心苷類
4.6.1強心苷類的主要性質
4.6.2強心苷類的檢識反應
4.6.3強心苷類的提取分離
4.7揮發油
4.7.1揮發油的主要性質
4.7.2揮發油成分的提取
4.7.3揮發油成分的分離
4.7.4揮發油的鑒定
4.8抗生素
4.8.1抗生素的種類
4.8.2抗生素的效價測定
主要參考文獻
第5章細胞分析檢測技術
5.1細胞的分離與培養
5.1.1細胞培養技術的特點與應用
5.1.2培養細胞生長的條件
5.1.3原代培養細胞的取材與分離
5.2細胞形態與活性的常規檢測法
5.2.1普通顯微染色觀察法
5.2.2 MTT法
5.3數字顯微及激光共聚焦顯微分析法
5.3.1數字顯微分析法
5.3.2激光掃描共聚焦顯微觀察分析法
5.4流式細胞術檢測技術
5.4.1流式細胞術的發展簡史
5.4.2流式細胞術的基本結構和工作原理
5.4.3流式細胞術的應用
主要參考文獻
第6章功效與代謝檢測技術
6.1保健食品功效檢測與評價
6.1.1保健食品概述
6.1.2保健食品功能檢測
6.2藥理檢測技術
6.2.1藥效學檢測技術
6.2.2藥物代謝動力學檢測技術
主要參考文獻
第7章生物安全評價方法與技術
7.1生物安全性評價基本方法
7.1.1急性毒性試驗
7.1.2蓄積毒性試驗
7.1.3亞急性毒性試驗
7.1.4慢性毒性試驗
7.1.5致癌試驗
7.1.6致突變試驗
7.1.7代謝試驗
7.2各主要制品生物安全性評價
7.2.1食品安全性評價
7.2.2藥物毒理及安全性評價
7.2.3化妝品毒理及安全性評價
7.2.4轉基因產品的安全性評價
7.3質量安全認證
7.3.1 HACCP認證
7.3.2 GMP認證
7.3.3 Qs認證
7.3.4其他與生物技術產品相關的認證
主要參考文獻
第8章生物傳感器及生物芯片技術
8.1生物傳感器
8.1.1生物傳感器的結構和原理
8.1.2生物傳感器的定義與分類
8.1.3幾種主要的生物傳感器
8.2生物芯片
8.2.1生物芯片的制造
8.2.2生物芯片的使用和閱讀
8.2.3各種生物芯片
8.2.4生物芯片的應用
主要參考文獻
書摘/試閱
3）壓榨法 此法適用于含油量多的鮮材料，如鮮橘皮等，用機械壓榨的方法將揮發油
從植物組織中擠壓出來。此法由于在常溫下進行，故揮發油的成分和氣味未受到任何影響。
但產品混有水分、黏液質和植物組織碎片，因而常呈混濁狀態，需較長時間靜置，使砷和其他雜
質分離。此外，此法很難將鮮材料中的揮發油壓盡，通常壓榨后的殘渣尚需再進行水蒸氣蒸
餾，將殘留的揮發油完全蒸出。
除去上述提取法外，近年來超臨界流體萃取法亦用于揮發油的提取，在香料工業方面常采
用吸收法、吹氣冷凍法收集花中的揮發油。
4.7.3揮發油成分的分離
常用的分離方法有分餾法、化學分離法、吸附層析法和氣相層析法等。在實際工作中，常
需幾種方法配合應用才能達到目的。
1）分餾法 揮發油中由于各成分碳原子數、雙鍵數及含氧功能基的不同，使它們的沸
點存在一定的差異，故可用分餾法，尤其是減壓分餾法進行分離。
2）化學分離法 根據揮發油中各組分功能基的不同，用不同的化學反應，使其轉變成
水溶性的化合物與揮發油分離。將揮發油粗品溶于乙醚，用1％的鹽酸或硫酸溶液萃取，使揮
發性的堿性化合物成鹽溶于水，分出酸水層后堿化，再用乙醚萃取揮發性的堿性化合物，乙醚
層用5％的碳酸氫鈉溶液、2％氫氧化鈉溶液依次萃取酸性、酚性及其他弱酸性成分，分別分出
堿水層，酸化后用乙醚萃取揮發性的酸性成分、揮發性的酚性成分及其他弱酸性成分，乙醚層
加入30％亞硫酸氫鈉溶液，在低溫下短時間振搖萃取。一般含羰基化合物的亞硫酸氫鈉加成
物析出（有時亦可為水溶性的加成物），分出結晶析出物，加酸或加堿使加成物分解，再用乙醚
萃取揮發性原碳基化合物（包含醛和甲基酮類化合物）。采用此法分離時應注意操作條件，提
取時間過長或溫度過高，有可能使結構中雙鍵發生加成，形成不可逆的雙鍵加成物。
3）吸附層析法 硅膠和氧化鋁吸附柱層析法是揮發油各成分分離最常采用的方法，洗
脫劑常用己烷或石油醚及它們和乙酸乙酯的混合溶劑，梯度洗脫可將揮發油中各成分按極性
由低至高的順序洗下。對于一些揮發性較大的成分，不宜直接進行層析，可先制成揮發性低的
衍生物再進行層析分離。一些低分子質量的醛酮類混合物，因易揮發，在層析過程中損失量較
大，所以常制成2，4-二硝基苯腙衍生物后再進行層析分離。對于一些只是由于雙鍵情況不同
的同分異構體的分離，采用一般的吸附層析法效果很不理想，若改用硝酸銀處理過的硅膠
（1kg硅膠加6％硝酸銀水溶液1L，攪拌均勻后干燥）柱進行層析，常可得到理想的分離結果。
此種層析法是利用雙鍵與銀離子形成π-絡合物力的強弱不同進行分離，對末端雙鍵化合物絡
合能力既大于順式化合物，又大于反式化合物。例如，石菖蒲揮發油中的α-細辛醚、β-細辛醚
和歐細辛醚采用硝酸銀硅膠柱分離時，具反式雙鍵的α-細辛醚最先洗脫，其次是順式雙鍵的β-
細辛醚，而具末端雙鍵的歐細辛醚則最后洗脫。
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