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無形體病原菌P44外膜蛋白表達基因簇及表達區域研究(簡體書)
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無形體病原菌P44外膜蛋白表達基因簇及表達區域研究(簡體書)

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目次
書摘/試閱

商品簡介

《無形體病原菌P44外膜蛋白表達基因》主要內容包括:人畜共患疾病的概念、人畜共患疾病流行現狀與特點、人畜共患疾病的分類及共同特點、人畜共患疾病的防治策略及措施、立克次體的形態與特徵、繁殖與傳播形式、感染機制等。

作者簡介

烏日圖,1971年7月生,蒙古族,內蒙古自治區巴彥淖爾市人,2009年畢業于日本靜岡縣立大學大學院,獲微生物學博士學位。2009年至2011年在日本國家感染症研究院做博士後研究。日本微生物學會以及細菌學會會員。現在中國少數民族傳統醫學研究院從事教學和科研工作。參與國家自然科學基金研究項目3項,主持承擔中央民族大學“985工程”子課題1項,企業橫向課題1項。在SCI及核心期刊發表論文10餘篇。

名人/編輯推薦

《無形體病原菌p44外膜蛋白表達基因簇及表達區域研究》由中央民族大學出版社出版。

目次

第一章緒論
第一節關於人畜共患“新發、再發感染症”
一、人畜共患疾病的概念
二、人畜共患疾病流行現狀與特點
三、人畜共患疾病的分類及共同特點
四、人畜共患疾病的防治策略及措施
第二節立克次體(Rickettsia)
一、立克次體的形態與特徵
二、繁殖與傳播形式
三、感染機制
第三節新發感染症Humanehrlichiosis(HMG)與Humananaplasmosis(HGE)
一、A.phagocytophilum與E.chaffeensis病原體的形態與特徵
二、A.phagocytophilum與E.chaffeensis細菌在細菌分類學上的位置
三、A.phagocytophilum與E.chaffeensis病原體的傳播以及分佈
第四節A.phagocytophilum病原體p44主要外膜蛋白表達基因
一、p44主要外膜蛋白群“P44majoroutermembraneproteins”及p44基因組“p44multigenefamily”
二、p44基因簇“p44multigenefamily”的基因簇換
三、關於A.phagocytophilum病原體p44基因簇研究的現狀以及研究目的

第二章關於日本靜岡縣和山梨縣地區Ixodes屬蜱蟲體內A.phagocytophilum病原體p44基因簇的解析
第一節序言
第二節實驗材料與方法
一、蜱蟲的採集與唾液腺DNA的提取
二、p44基因簇的檢測方法
三、p44基因簇PCR擴增物的克隆
四、DNA序列的確定
五、DNA序列解讀分析與系統發生樹的解析
第三節結論與思考

第三章關於日本靜岡縣蜱蟲體內Aphagocytophilum病原體p44基因表達區域的解析
第一節序言
第二節p44表達區域內p44基因片段部分的解析(實驗1)
一、實驗(1)方法
二、實驗(1)結果
第三節p44表達區域omp-IX、omp-IN、recA以及vaIS基因片段的測定解析(實驗2)
一、實驗(2)方法
二、實驗(2)結果
第四節應用GenomeWalker法對p44表達區域內omp-IX、omp-IN、recA以及vaIS基因片段的測定解析(實驗3)
一、實驗(3)方法
二、實驗3結果
第五節結論與思考

第四章日本東北地區Ixodes屬蜱蟲體內A.phagocytophilum病原體p44基因表達區域的解析
第一節序言
第二節A.phagocytophilump44基因簇的測定
……
第五章總論
參考文獻

書摘/試閱



第三節 結論與思考
綜上所述,我們在日本靜岡縣和山梨縣地區3個點,利用小旗采集法合計采集到123只I.persulcatus(全溝硬蜱)以及I.ovatus(卵形硬蜱)類的Ixodes屬(硬蜱屬)蜱蟲。然后對上述蜱蟲實施了唾液腺摘取以及DNA提取。利用Nested PCR法進行A.phagocytophilum的檢測目標基因“p44基因簇”的測定實驗。其結果,在123只蜱蟲里有20只的DNA提取物中獲得了理想的擴增產物。將所獲得的擴增物進行分子克隆并解讀了它們的基因序列。經過同源性比較后發現它們與迄今所發現的許多A.phagocytophilum的p44基因簇片段具有很高的相似性。因此可以明確這20只蜱蟲是已經被A.phagocytophilum病原體所感染,也就是說它們很有可能就是A.phagocytophilum病原體的媒介蜱蟲。這20只蜱蟲中9只(6只為I.persulcatus、3只為I.ovatus)是在First PCR反應中有擴增物,而在NestedPCR反應中沒有得到應有的擴增物。因此我們重新將采集到的10只I.persulcatus蜱蟲碾碎混合為一個樣本進行組織DNA提取,其DNA分析結果表明,不只在Nested PCR反應中得到擴增物而且在First PCR反應中也有相同的擴增物。
本研究中我們為了更加詳細深入地了解A.phagocytophilum的p44基因簇的基因構造盡可能地收集解析了長度更長、數量更多的First PCR反應擴增物。因此在本實驗中我們將First PCR反應中獲得的9只A.phagocytophilum陽性蜱蟲及1個10只蜱蟲的混合體DNA PCR擴增物進行了TA克隆并成功的獲得了合計174個p44基因的克隆體。它們分別是6只I.persulcatus個體及1個10只I.persulcatus的混合體中得到的117個克隆,3只I.ovatus個體中的57個克隆體。對所有174個克隆的序列進行了基因解讀以及氨基酸序列的轉換解析我們發現,這些克隆體的序列是包含p44基因的超可變區域共有144—163個氨基酸序列所構成。之后我們又對這些克隆進行了氨基酸序列對比得出,174個克隆體中有80個的序列是互不相同的而另外的94個克隆是與這些克隆序列有著重復的或者說相同的序列。
從蜱蟲的角度來說我們明白了3只I.ovatus(卵形硬蜱)中所得的57個克隆中有52個克隆序列的相似性非常高是屬同一個集群。但是對于I.persulcatus(全溝硬蜱)中得到的117個p44基因的克隆卻分散在系統發生樹的各個集群內,表現了很大的差異性(圖2—5)。

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