細胞培養技術（簡體書）

醫學科學研究飛速發展，醫學研究的手段相互交叉、跨越和滲透，促進了醫學各學科的進步。細胞培養技術在醫學研究領域中是許多學科間交叉和系統研究的重要手段之一，在病毒學、免疫學、細胞生物學、分子生物學、遺傳學、毒理學和藥理學等學科中得到了廣泛的應用。細胞培養技術為深入探討疾病發生、發展機制，為尋找疾病有效地治療途徑提供了重要的研究技術平臺。因此，細胞培養技術是高等醫學院校許多基礎和臨床等專業的研究生在進行課題研究時希望掌握和應用的技術。為了適應研究生在實驗研究中的需要，我們學校從1998年就開設了“組織與細胞培養技術”課程，因此，在多年教學的基礎上，我們編寫了這本《全國高等醫學院校研究生教材：細胞培養技術》。該教材適用于包括基礎醫學、臨床醫學、預防醫學和藥學等醫學各類專業研究生的需要。

緒論
第一節 細胞培養技術發展簡史
第二節 組織培養技術的應用
第一篇 基本理論知識
第一章 體外培養細胞的特征
第一節 培養細胞生物學特征
第二節 培養細胞生存條件和代謝
第三節 體外培養細胞成功率分析
第四節 細胞系或細胞株的建立

第二篇 細胞培養技術
第二章 細胞培養的基本條件
第一節 細胞培養的實驗設施及器材
第二節 實驗器材的處理
第三節 細胞培養常用培養液及試劑
第三章 細胞培養的基本實驗技術
第一節 無菌技術
第二節 標本采集的選擇與處理
第三節 單細胞的制備
第四節 初代細胞培養法
第五節 傳代細胞培養法
第六節 懸浮細胞培養法
第七節 玻片培養法
第八節 細胞計數法
第九節 細胞凍存、復蘇與運輸
第十節 細胞污染的檢測與排除
第四章 動物組織細胞培養技術
第一節 大鼠肝細胞培養
第二節 新生兔腎細胞培養
第三節 大鼠胰島細胞培養
第四節 動物心肌細胞培養
第五節 兔軟骨細胞培養
第六節 新生大鼠骨骼肌細胞培養
第七節 兔主動脈平滑肌細胞培養
第八節 兔主動脈內皮細胞培養
第九節 大鼠神經組織細胞培養
第十節 小鼠骨髓細胞培養
第十一節 雞胚成纖維細胞培養
第五章 人源組織細胞培養技術
第一節 人胚腎細胞培養
第二節 人胚肺二倍體細胞培養
第三節 人表皮角質形成細胞的培養
第四節 人臍帶血管內皮細胞培養
第五節 腫瘤細胞的培養
第六節 羊水細胞的培養
第七節 淋巴細胞分離培養
第六章 干細胞培養技術
第一節 飼養層細胞制備
第二節 胚胎干細胞的分離培養
第三節 成體干細胞的分離培養
第四節 腫瘤干細胞的分離培養
第五節 干細胞生物學性狀鑒定

第三篇 細胞培養檢測技術
第七章 細胞培養形態學檢查
第一節 生長狀態及一般形態檢查
第二節 倒置光學顯微鏡檢測法
第三節 熒光顯微鏡檢測法
第四節 電子顯微鏡檢測法
第八章 細胞活性和增殖的檢測
第一節 細胞計數
第二節 細胞活性的檢查
第三節 細胞生長曲線法
第四節 細胞克隆形成試驗
第五節 軟瓊脂集落形成試驗
第九章 細胞培養分析技術
第一節 細胞遺傳學檢測技術
第二節 細胞DNA的檢測
第三節 細胞RNA的檢測
第四節 細胞基因表達產物的檢測
第五節 細胞?活性的檢定
第六節 細胞凋亡的檢測
……
第四篇 細胞培養技術的應用
附錄
1．中英文詞匯對照索引
2．實驗室常用的細胞系
3．實驗室常用人工合成的細胞培養基
4．細胞培養相關實驗用緩沖液

腫瘤對人類健康危害極大，但由于其發生因素復雜，包括體內因素和環境因素，如遺傳因素，物理、化學、生物因素等，導致各種腫瘤的發生機制各不相同。至今尚有許多腫瘤的發病機制、準確診斷、有效治療均不明確，尚需深入研究。腫瘤細胞具有永生性，在體外可以無限傳代培養，因此體外細胞培養技術則成為研究腫瘤細胞生物學特性、腫瘤發生機制以及腫瘤藥物的篩選等重要手段。本章主要介紹細胞轉化試驗、腫瘤細胞浸潤實驗、腫瘤細胞癌基因及抑癌基因檢測等方面的相關實驗。
第一節 培養細胞轉化實驗
細胞惡性轉化，即癌變，是一個發生在體內的過程，但在細胞培養條件下，可以用人工方法誘發產生，建立體外癌變模型。因此，人工誘發體外培養細胞的轉化，是研究癌變原理的重要方法，其優點不僅是重復性好，可廣泛用于研究可疑致癌因素的作用和檢測環境中的致癌物，并且在細胞發生轉化後，能夠進行直接觀察和做各種分析。為此，這一技術當前在國內外已普遍應用。轉化實驗的方法主要包括人工誘導細胞轉化、試管內誘發癌實驗法和體內分化誘導方法。一、人工誘發細胞惡性轉化在細胞培養條件下，用化學、物理和生物等各種致癌物可人為地誘發細胞發生惡性轉化。條件是要讓細胞直接受到致癌物的作用，從細胞受到作用後到發生惡性轉化一般需兩周到三個月的時間。
……