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發酵工程實驗(簡體書)
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發酵工程實驗(簡體書)

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商品簡介
目次

商品簡介

《發酵工程實驗》是與發酵工程理論課相配套的實驗教材。內容包括3部分:緒論、發酵工程基本實驗和綜合實驗。緒論部分主要介紹發酵實驗室的基本要求和設備,統計學方法的實驗設計和數據處理。基本實驗包括6部分:①菌種選育,介紹了4類常用的菌種選育方法:物理誘變、化學誘變、原生質體融合和基因工程方法。②培養基配制與滅菌,介紹了微生物對營養的要求及常用的營養成分,培養基配制方法和注意事項。③搖瓶發酵,介紹了搖瓶發酵的基本操作,包括接種、移種、種子制備、發酵的單元操作技術。④發酵生化參數的檢測,介紹了發酵過程常規的參數檢測方法,如菌濃、基質、產物濃度的檢測方法,同時還介紹了核酸、酶活、蛋白質等反應代謝的參數。⑤儀器分析,介紹了用氣相色譜儀、液相色譜儀等檢測代謝中間物的原理與方法。⑥過程工程參數檢測,主要是介紹反應器中K1a、攪拌轉速、氧傳遞速率的檢測方法。綜合實驗是在基本實驗基礎上的提高,實驗既有發酵全過程的訓練如培養、參數檢測、過程動力學分析的組合,也有內容的拓展,如酶反應、動物細胞培養等。本教材可作為生物工程專業、發酵工程專業本科生的實驗教材,也可以作為碩士和博士研究生實驗的參考教材。

目次

緒論
一、發酵工程實驗的特點
(一)發酵工程實驗的目的和要求
(二)實驗室的一般要求
二、發酵工程實驗室的特點與要求
(一)發酵工程實驗的特點
(二)發酵工程實驗的要求
(三)發酵工程實驗室的安排
三、發酵工程實驗設計(方案)的基本步驟
(一)實驗設計(方案)的內容及要求
(二)實驗設計(方案)的擬定步驟
(三)數據回歸分析
四、發酵工程實驗常用的設備
(一)搖瓶
(二)搖床
(三)發酵罐
第一部分 基本技能實驗
第一章 菌種改造
第一節 菌種分離純化和自然選育
第二節 微生物的誘變育種
(一)誘變育種步驟
(二)物理誘變與化學誘變
第三節 富集培養技術在育種中的應用
(一)抗性突變株的富集
(二)營養缺陷型的富集
第四節 原生質體育種
(一)標記菌株的篩選
(二)原生質體的制備
(三)原生質體的再生
(四)原生質體的融合
(五)融合子的選擇
實驗一 菌種的分離純化
實驗二 紫外誘變
實驗三 微波誘變
實驗四 亞硝基胍誘變
實驗五 噬菌體的分離和測定
實驗六 抗噬菌體菌種選育
實驗七 氨基酸抗反饋調節突變株的選育
實驗八 大腸桿菌營養缺陷型的篩選
實驗九 原生質體制備及再生
實驗十 原生質體融合
第五節 基因組改組技術
第六節 微生物基因工程技術及其在微生物種中的應用
(一)目的基因的獲取
(二)克隆載體的選擇與構建
(三)外源基因與載體的連接
(四)重組DNA導人受體細胞
(五)重組體的篩選
(六)克隆基因的表達
(七)PCR技術擴增目的基因
實驗十一 基因組改組技術篩選蛋白酶高產菌株
實驗十二 基因組DNA的提取
實驗十三 煮沸法快速提取質粒DNA
實驗十四 堿裂解法抽提質粒DNA與鑒定
實驗十五 DNA的限制性內切酶消化
實驗十六 瓊脂糖電泳檢測DNA
實驗十七 PCR技術擴增枯草桿菌deoD基因
實驗十八 重組T質粒的構建
實驗十九 感受態的制備和轉化
實驗二十 重組質粒的鑒定——菌落PCR

第二章 培養基配制與滅菌
第一節 培養基的配制
(一)微生物的營養需求及對物質的吸收
(二)培養基
(三)培養基的配制
第二節 高壓蒸汽滅菌
(一)滅菌與消毒的基本概念
(二)高壓蒸汽滅菌的原理
(三)高壓滅菌設備
實驗二十一 培養基的配制
實驗二十二 高壓滅菌鍋的使用

第三章 搖瓶發酵
第一節 發酵原理
(一)營養
(二)溫度
(三)pH
(四)溶氧
第二節 搖瓶發酵實驗
實驗二十三 接種工具的認識與滅菌
實驗二十四 接種和移種
實驗二十五 枯草芽孢桿菌生產腺苷
實驗二十六 重組大腸桿菌羧肽酶的表達
實驗二十七 洛伐他汀發酵
實驗二十八 林可霉素發酵
實驗二十九 四環素類抗生素定向發酵
實驗三十 半乳糖苷酶生成的調節
實驗三十一 芽孢桿菌發酵產堿性蛋白酶

第四章 發酵生化參數的測定
第一節 生化參數測定原理
第二節 生化參數分析方法
實驗三十二 比濁法測定發酵液中大腸桿菌濃度
實驗三十三 測定菌體干重
實驗三十四 紫外分光光度法定量測定細胞總核酸
實驗三十五 紅霉素效價的化學法測定一
實驗三十六 紅霉素效價的化學法測定二
實驗三十七 紅霉素生物效價的測定
實驗三十八 二劑量法測定林可霉素生物效價
實驗三十九 利福霉素化學效價的測定
實驗四十 檸檬酸含量測定一
實驗四十一 檸檬酸含量測定二
實驗四十二 衣康酸含量測定
實驗四十三 丙酮酸含量測定
實驗四十四 用SBA-40C型生物傳感分析儀測定谷氨酸和谷氨酰胺
實驗四十五 華勃氏呼吸儀測定谷氨酸的

實驗四十六 雙縮脲法測定蛋白質含量
實驗四十七 Folin-酚法測定蛋白質濃度
實驗四十八 考馬斯亮藍法測定蛋白質濃度
實驗四十九 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)檢測蛋白表達和測定蛋白質相對分子質量
實驗五十 發酵液中糖含量的測定
實驗五十一 DNS法測定還原糖濃度
實驗五十二 酶試劑盒法測定葡萄糖含量
實驗五十三 SBA-40型谷氨酸(乳酸)-葡萄糖雙功能分析儀測定葡萄糖含量
實驗五十四 發酵液氮含量的測定
實驗五十五 靛酚藍法測定銨離子
實驗五十六 鉬酸銨法測定無機磷
實驗五十七 還原法測定無機磷
實驗五十八 鉬釩法測定無機磷
實驗五十九 無細胞抽提液的制備
實驗六十 葡萄糖激酶的酶活測定
實驗六十一 磷酸果糖激酶的測定
實驗六十二 異檸檬酸脫氫酶活力測定
實驗六十三 6-磷酸葡萄糖脫氫酶的測定
實驗六十四 丙酮酸激酶活力測定
實驗六十五 檸檬酸合成酶活力測定
實驗六十六 堿性磷酸酶(AKP)酶活測定
實驗六十七 脂肪酶活力測定
實驗六十八 堿性蛋白酶活力測定
實驗六十九 酰基激酶活力的測定
實驗七十 酰基CoA合成酶活力的測定

第五章 色譜分析在發酵工程中的應用
第一節 色譜分析概述
(一)氣相色譜法的特點
(二)氣相色譜分離條件的選擇
(三)液相色譜法的特點
(四)高效液相色譜分析方法的建立
第二節 色譜法在發酵工程中的應用
(一)反相HPLC雙檢測器法同時測定發酵液中的有機酸與葡萄糖
(二)AQC柱前衍生高效液相色譜法測定發酵液中21種氨基酸
(三)利用反相高效液相色譜法測定發酵液中的生物素含量
(四)利用乙腈作為內標氣相色譜法快速測定發酵液中的乳酸

第六章 過程工程參數測定
第一節 微生物反應器的混合原理
第二節 微生物反應器的氧傳遞過程原理
實驗七十一 亞硫酸鈉氧化法測定氧傳遞系數K1a
實驗七十二 用溶氧電極法的動態法測定氧傳遞系數K1a
實驗七十三 混合時間測定

第二部分 綜合實驗
第七章 微生物培養
實驗一 聚賴氨酸生產菌株的選育與發酵工藝的研究
實驗二 D-核糖發酵
實驗三 重組大腸桿菌發酵人銅鋅超氧化物歧化酶的高密度、高表達
實驗四 黑曲霉產纖維素酶液體發酵
實驗五 擬干酪乳桿菌發酵生產乳酸
實驗六 嘌呤核苷磷酸化酶在大腸桿菌中表達和酶學性質測定
實驗七 酶催化蔗糖轉化反應
實驗八 酵母培養中的基質代謝、呼吸和生長的參數檢測與參數相關分析
實驗九 酵母菌厭氧乙醇發酵
實驗十 重組畢赤酵母高密度發酵表達植酸酶及其分離純化

第八章 動物細胞培養
實驗十一 造血細胞分離、集落培養及表型分析
實驗十二 動物細胞的培養和計數
實驗十三 細胞的冷凍和復蘇
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