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目次
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《醫學分子細胞生物學:研究策略與技術原理》從生物醫學相關前沿領域的研究主題切入，著重介紹所涉及的分子生物學和細胞生物學的技術原理與研究策略。全書共分14章，內容涉及基因組學、基因克隆、基因的表達與調控、非編碼小RNA、蛋白質組學、蛋白質結構、細胞顯微成像、細胞內信號轉導及組織細胞電生理學等分子和細胞生物學的核心技術。另外，我們還選擇了5個重要的技術專題，包括動物基因修飾、腫瘤生物標志物篩選、分子藥物靶點、干細胞及基于網絡的生物信息利用，旨在幫助讀者盡快掌握生物醫學重要前沿領域的研究策略和技術原理，從而采用合適的方法和技術解決相關的科學問題。
《醫學分子細胞生物學:研究策略與技術原理》適于作為現代生物醫學相關專業研究生的實驗課程教材或研究參考書，也可作為生物學、農學、醫學及藥學等專業高年級本科生，以及生物醫藥領域科研工作者的科研參考書。
《醫學分子細胞生物學:研究策略與技術原理》適于作為現代生物醫學相關專業研究生的實驗課程教材或研究參考書，也可作為生物學、農學、醫學及藥學等專業高年級本科生，以及生物醫藥領域科研工作者的科研參考書。
名人/編輯推薦
《醫學分子細胞生物學:研究策略與技術原理》是華夏英才基金學術文庫之一。
目次
前言
第一章 基因組學
第一節 概述
一、基因組學基本概念
二、人類基因組計劃
第二節 研究策略及基本原理
一、遺傳或連鎖圖譜
二、物理或分子圖譜
三、基因組測序
四、基因芯片技術
五、基因克隆策略
第三節 相關實驗技術及應用舉例
一、RFLP作圖操作舉例
二、放射性雜交文庫構建
三、全自動熒光標記法測序
四、基因組測序舉例
五、基因芯片的操作舉例
第二章 基因克隆及表達技術
第一節 概述
第二節 基于細胞的DNA分子克隆
一、基于細胞的DNA克隆的原理和方法
二、DNA文庫
三、克隆載體系統
第三節 克隆基因的表達
一、表達型克隆的原理和基本條件
二、克隆基因在原核細胞中的表達
三、克隆基因在真核細胞中的表達
四、克隆基因表達產物的檢測
第三章 真核細胞基因轉錄起始調控研究
第一節 概述
一、順式作用元件
二、反式作用因子
第二節 真核基因轉錄起始調控的研究策略
一、啟動子的分析
二、轉錄因子的分析
第三節 真核基因轉錄起始調控的相關技術原理
一、啟動子序列的克隆
二、啟動子及轉錄因子的鑒定
第四節 應用與實例
第四章 非編碼小RNA
第一節 非編碼小RNA概述
一、RNAi概述
二、microRNA概述
三、miRNA和siRNA的比較
第二節 非編碼小RNA的研究策略
一、RNAi的研究策略
二、miRNA的研究策略
三、總結
第三節 非編碼小RNA應用領域及其技術原理
一、RNAi技術的應用及其原理
二、miRNA的作用及其原理
第五章 蛋白質組學
第一節 概述
一、蛋白質組學的概念及其發展史
二、蛋白質組學的特點
三、蛋白質組學的研究方法和發展趨勢
第二節 研究策略
一、定量蛋白質組學
二、蛋白質組翻譯後修飾研究策略
三、蛋白質的相互作用研究策略
四、亞蛋白質組學研究策略
第三節 技術原理
一、蛋白質樣品制備技術
二、蛋白質樣品分離技術
三、蛋白質樣品鑒定技術——質譜技術
四、蛋白質組生物信息學
第六章 生物大分子結構研究技術
第一節 概述
第二節 研究策略、技術原理和應用
一、X射線晶體衍射分析
二、核磁共振技術
……
第七章 細胞成像
第八章 組織細胞電生理學技術
第九章 細胞內信號轉導的研究
第十章 動物基因修飾技術
第十一章 腫瘤生物標志物的篩選策略
第十二章 分子藥物靶點的研究
第十三章 干細胞實驗研究
第十四章 網絡生物信息數據庫及相關軟件的應用
名詞索引
第一章 基因組學
第一節 概述
一、基因組學基本概念
二、人類基因組計劃
第二節 研究策略及基本原理
一、遺傳或連鎖圖譜
二、物理或分子圖譜
三、基因組測序
四、基因芯片技術
五、基因克隆策略
第三節 相關實驗技術及應用舉例
一、RFLP作圖操作舉例
二、放射性雜交文庫構建
三、全自動熒光標記法測序
四、基因組測序舉例
五、基因芯片的操作舉例
第二章 基因克隆及表達技術
第一節 概述
第二節 基于細胞的DNA分子克隆
一、基于細胞的DNA克隆的原理和方法
二、DNA文庫
三、克隆載體系統
第三節 克隆基因的表達
一、表達型克隆的原理和基本條件
二、克隆基因在原核細胞中的表達
三、克隆基因在真核細胞中的表達
四、克隆基因表達產物的檢測
第三章 真核細胞基因轉錄起始調控研究
第一節 概述
一、順式作用元件
二、反式作用因子
第二節 真核基因轉錄起始調控的研究策略
一、啟動子的分析
二、轉錄因子的分析
第三節 真核基因轉錄起始調控的相關技術原理
一、啟動子序列的克隆
二、啟動子及轉錄因子的鑒定
第四節 應用與實例
第四章 非編碼小RNA
第一節 非編碼小RNA概述
一、RNAi概述
二、microRNA概述
三、miRNA和siRNA的比較
第二節 非編碼小RNA的研究策略
一、RNAi的研究策略
二、miRNA的研究策略
三、總結
第三節 非編碼小RNA應用領域及其技術原理
一、RNAi技術的應用及其原理
二、miRNA的作用及其原理
第五章 蛋白質組學
第一節 概述
一、蛋白質組學的概念及其發展史
二、蛋白質組學的特點
三、蛋白質組學的研究方法和發展趨勢
第二節 研究策略
一、定量蛋白質組學
二、蛋白質組翻譯後修飾研究策略
三、蛋白質的相互作用研究策略
四、亞蛋白質組學研究策略
第三節 技術原理
一、蛋白質樣品制備技術
二、蛋白質樣品分離技術
三、蛋白質樣品鑒定技術——質譜技術
四、蛋白質組生物信息學
第六章 生物大分子結構研究技術
第一節 概述
第二節 研究策略、技術原理和應用
一、X射線晶體衍射分析
二、核磁共振技術
……
第七章 細胞成像
第八章 組織細胞電生理學技術
第九章 細胞內信號轉導的研究
第十章 動物基因修飾技術
第十一章 腫瘤生物標志物的篩選策略
第十二章 分子藥物靶點的研究
第十三章 干細胞實驗研究
第十四章 網絡生物信息數據庫及相關軟件的應用
名詞索引
書摘/試閱
1.磷酸化蛋白的分離和檢測
最常用且實用的分離和檢測磷酸化蛋白的方法有三種。?雙向凝膠電泳：目前多采用二維凝膠電泳分離磷酸化蛋白，水解蛋白質條帶或蛋白斑點，提取所產生的磷酸?混合物作進一步分析。對細胞內含量較少的磷酸化蛋白，如磷酸化絲氨酸蛋白等，電泳前蛋白的富集和特殊標定至關重要。?抗磷酸化抗體免疫沉淀和Western印跡法：抗磷酸氨基酸抗體可以檢測轉印至膜上的磷酸蛋白，此法敏感性很高，其最大的優點在于無須放射性同位素標記。目前，已有較好的抗酪氨酸磷酸化抗體可供選擇。用特異性抗磷酸氨基酸抗體免疫沉淀含有磷酸化殘基的蛋白質，然後利用Western印跡法檢測的方法已成為選擇性分離和檢測磷酸化蛋白的常用手段。?雙相磷酸多?譜圖：雙相磷酸多?譜圖的第一相是在薄層纖維板上進行多?電泳，然後在同一塊板上進行薄層色譜。分離得到的磷酸化多?用自顯影或磷儲屏進行檢測。該法可獲取蛋白質磷酸化的重要信息，提取後可直接用于質譜分析。
2.蛋白質磷酸化位點的鑒定
質譜技術產生前，磷酸化氨基酸的定位主要使用Edman法，通過磷酸絲氨酸向S-乙?半胱氨酸或磷酸蘇氨酸向B-甲基-S-乙?半胱氨酸的轉化來證實絲氨酸和蘇氨酸的磷酸化。隨著質譜技術的產生和發展，各種質譜技術已逐漸被應用于蛋白質磷酸化分析和磷酸化位點的鑒定。蛋白?消化後多?串聯質譜所產生的片段離子梯度代表了特異性氨基酸序列。同時，質譜分析也可用于鑒定轉錄後修飾的多?，且能對這種修飾進行定位。以四極飛行時間串聯質譜和固相化金屬親和色譜相結合鑒定蛋白質磷酸化位點的方法，已被證實可以在微量（pmol級）水平對某些蛋白激?亞單位的磷酸化位點進行準確測定。
最常用且實用的分離和檢測磷酸化蛋白的方法有三種。?雙向凝膠電泳：目前多采用二維凝膠電泳分離磷酸化蛋白，水解蛋白質條帶或蛋白斑點，提取所產生的磷酸?混合物作進一步分析。對細胞內含量較少的磷酸化蛋白，如磷酸化絲氨酸蛋白等，電泳前蛋白的富集和特殊標定至關重要。?抗磷酸化抗體免疫沉淀和Western印跡法：抗磷酸氨基酸抗體可以檢測轉印至膜上的磷酸蛋白，此法敏感性很高，其最大的優點在于無須放射性同位素標記。目前，已有較好的抗酪氨酸磷酸化抗體可供選擇。用特異性抗磷酸氨基酸抗體免疫沉淀含有磷酸化殘基的蛋白質，然後利用Western印跡法檢測的方法已成為選擇性分離和檢測磷酸化蛋白的常用手段。?雙相磷酸多?譜圖：雙相磷酸多?譜圖的第一相是在薄層纖維板上進行多?電泳，然後在同一塊板上進行薄層色譜。分離得到的磷酸化多?用自顯影或磷儲屏進行檢測。該法可獲取蛋白質磷酸化的重要信息，提取後可直接用于質譜分析。
2.蛋白質磷酸化位點的鑒定
質譜技術產生前，磷酸化氨基酸的定位主要使用Edman法，通過磷酸絲氨酸向S-乙?半胱氨酸或磷酸蘇氨酸向B-甲基-S-乙?半胱氨酸的轉化來證實絲氨酸和蘇氨酸的磷酸化。隨著質譜技術的產生和發展，各種質譜技術已逐漸被應用于蛋白質磷酸化分析和磷酸化位點的鑒定。蛋白?消化後多?串聯質譜所產生的片段離子梯度代表了特異性氨基酸序列。同時，質譜分析也可用于鑒定轉錄後修飾的多?，且能對這種修飾進行定位。以四極飛行時間串聯質譜和固相化金屬親和色譜相結合鑒定蛋白質磷酸化位點的方法，已被證實可以在微量（pmol級）水平對某些蛋白激?亞單位的磷酸化位點進行準確測定。
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